Creatinina

MÉTODOS PARA LA DETERMINACIÓN DE CREATININA

MÉTODOS COLORIMÉTRICOS FUNDAMENTO VARIANTES

Se basan en la reacción de Jaffé que data del año 1886.

La creatinina reacciona con el ácido pícrico en medio alcalino formando un complejo de color rojo a una longitud de onda entre 510-520 nm.

Existen interferentes positivos, entre ellos las proteínas, glucosa, acetoacetato, ácido ascórbico y ácido úrico, e interferentes negativos, y de ellos el más importante es la bilirrubina. Frente a muestras con bilirrubinas elevadas, los valores de creatinina se ven disminuidos porque la bilirrubina en el medio alcalino se oxida a biliverdina formando un compuesto incoloro que disminuye el color de la reacción. Otra interferencia negativa, pero que adquiere más relevancia en neonatología es la hemoglobina de origen fetal, que a diferencia de la hemoglobina del adulto, es resistente al álcali; de esta manera, hace que cambie lentamente el color a lo largo del curso de la reacción, alterando y disminuyendo la coloración de la reacción.

PUNTO FINAL CINÉTICO

Que puede utilizar la desproteinización para eliminar las interferencias, sin embargo, no es muy útil, pues no elimina todas. Éste método fue utilizado en la práctica (Kit de Wiener)

Al medir la reacción en distintos tiempos, es útil para eliminar las interferencias positivas pues muchas de éstas como reacción a los 3 ó 5 minutos (proteínas, glucosa, ácido ascórbico). Casas comerciales: Valtek, GtLab, Wiener.

MÉTODOS ENZIMÁTICOS

Son de mayor especificidad, exactitud y precisión. Y son los más comparables a los métodos de referencia.

VARIANTES FUNDAMENTO

Determinación de sarcosina mediante la hidrólisis de creatinina por acción de la creatininasa y creatinasa.

(Wiener)

Método UV

Utilización de creatinina creatinina-amidohidrolasa. El método consiste encuatro pasos de reacción, pero en definitiva lo que semide es la disminución del NADH (lectura a 340 nm) (Abbott)

Método UV

Creatinina hidrolizada por CreatininDeiminasa. La disminución de lectura a 340 nm mide el descenso de concentración del NADH en el medio, siendo éste directamente proporcional a la concentración de creatinina (GtLab, Randox)

Bibliografía

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