Determinación Enzimática De Glucosa En Suero Sanguíneo.

I. TÍTULO: Determinación enzimática de glucosa en suero sanguíneo.

II. OBJETIVOS:

• Determinar la enzima de la glucosa en suero sanguíneo.

• Conocer la cantidad de glucosa que hay en las muestras.

Introducción

La concentración de glucosa en el plasma se mide cotidianamente en el laboratorio de muestras de sangre que se recogen en tubos que, en algunos laboratorios contienen fluoruro, un inhibidor de la glucolisis. A causa de la necesidad ocasional de obtener rápidamente los resultados de esta medición y la amplia difusión del autocontrol de los pacientes diabéticos, esta magnitud también se mide fuera de laboratorio empleando tiras reactivas. Los procedimientos de medida actuales usan reacciones enzimáticas especificas y proporcionan resultados bastantes exactos en todo el amplio espectro de concentraciones de glucosa en el plasma. La concentración de glucosa puede leerse de forma visual o con ayuda de un espectrómetro de reflectancia portátil. Es importante seguir el procedimiento de medida de forma exacta. El almacenamiento inadecuado de las tiras reactivas pueden afecta los resultados. Cualquier resultado francamente patológico o inesperado debe confirmarse en el laboratorio clínico.

La concentración de glucosa en el plasma medida en una muestra casual es la única magnitud necesaria en una situación urgente.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO:

La Glucosa Oxidasa cataliza la oxidación de la Glucosa formando así el peróxido de hidrogeno y D-glucono-d-lactona . El peróxido de hidrógeno se cuantifica vía la reacción de peroxidasa donde el oxígeno se transfiere del peróxido de hidrógeno a un aceptador cromático produciendo un tinte de quinoneimina. La intensidad del color del tinte es directamente proporcional a la concentración de la glucosa en la muestra del suero. El esquema de la reacción ilustra las eventos que ocurren en este procedimiento:

D-Glucosa Acido D-Glucónico +H202

H2O2+p-HBA+4-AAP H2O +Complejo coloreado

Espectrofotómetro: mide la cantidad de luz que pasa a través de un medio a una longitud de onda. Realiza dos funciones: 1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra 2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestra.

El baño María o baño de María es un método empleado en las industrias (farmacéutica, cosmética, de alimentos y conservas), en laboratorio de química y en la cocina, para conferir temperatura uniforme a una sustancia líquida o sólida o para calentarla lentamente, sumergiendo el recipiente que la contiene en otro mayor con agua que se lleva a o está en ebullición.

IV. PROCEDIMIENTO:

MATERIALES Y EQUIPOS

• Muestra : sangre

• Reactivos :

 Glucosa solución Standard 100ml/dl

 Glicemia

• Espectrofotómetro 505 nm

• Baño maría

• Cronometro

• Pipetas

• Tubo de ensayo

• Jeringas

• Lanceta

• Alcohol

• Algodón

• Centrifuga

Procedimiento:

Se extrajo la muestra de sangre de dos alumnos presentes en el laboratorio, con jeringas descartables y fueron puestas en un tubo de ensayo.

Luego se llevo las muestras a la centrifuga por 10 minutos, esto

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