Determinacion De Fosfatasa Alcalina
Enviado por nana2506 • 3 de Junio de 2012 • 475 Palabras (2 Páginas) • 2.461 Visitas
DETERMINACIÓN DE FOSFATASA ALCALINA”
I.- OBJETIVO.
El alumno realizará la determinación de Fosfatasa Alcalina en el suero sanguíneo mediante la técnica de espectrofotometría y empleará los conocimientos adquiridos en clase para realizar la interpretación de los resultados.
II.- INTRODUCCIÓN.
Distribuida en casi todos los tejidos del cuerpo, los niveles de Fosfatasa Alcalina son de interés para el diagnóstico de enfermedades hepatobiliares y enfermedades de los huesos. La mayoría de la Fosfatasa Alcalina normal en suero proviene del tracto biliar. Los niveles normales de la Fosfatasa Alcalina dependen de la edad, y son elevados durante períodos de crecimiento óseo. Los aumentos moderados del nivel de Fosfatasa Alcalina (sin incluir el hígado y el hueso) se pueden atribuir al mal de Hodgkin, congestión cardiaca y a infecciones bacterianas estomacales. También hay aumento en el tercer trimestre del embarazo.
Principio:
F. Alc
La secuencia enzimática de la reacción es la siguiente:
p-Npp + H2O p-Nitrofenol + H3PO4
El p-Nitrofenil Fosfato (p-Npp) es hidrolizado a p-Nitrofenol y fosfato inorgánico.
III.- MATERIAL Y REACTIVOS.
• Pipetas volumétricas Reactivo de Fosfatasa Alcalina
• Tubos
• Gradilla
• Cronómetro
• Espectrofotómetro Material Biológico: Suero
• Centrífuga
• Pipetas Automáticas
IV.- PROCEDIMIENTO.
1. Etiquetar el tubo como Problema.
2. Pipetee 3.0ml de reactivo de Fosfatasa Alcalina y permita que equilibre a 37° C.
3. Ponga en cero el espectrofotómetro con agua a 405nm.
4. Agregue 0.1ml (100µl) de suero problema al tubo con reactivo.
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