IMPLEMENTACIÓN DE METODOLOGÍAS ANALÍTICAS PARA DETERMINAR EL NIVEL DE DEGRADACIÓN DE LA CELULOSA EN SOPORTE PAPEL POR PROCESOS DE OXIDO REDUCCIÓN O HIDRÓLISIS.
Enviado por • 15 de Octubre de 2013 • 810 Palabras (4 Páginas) • 512 Visitas
IMPLEMENTACIÓN DE METODOLOGÍAS ANALÍTICAS PARA DETERMINAR EL NIVEL DE DEGRADACIÓN DE LA CELULOSA EN SOPORTE PAPEL POR PROCESOS DE OXIDO REDUCCIÓN O HIDRÓLISIS.
DETERMINACIÓN DE GLUCOSA POR EL MÉTODO DNS
La determinación de la degradación de la celulosa en soporte papel se realizo por el método del ácido 3,5-dinitrosalicilico (DNS), el cual se basa en la reducción del DNS (de color amarillo) por la glucosa al ácido 3- amino-5-dinitrosalicilico de color rojo previo calentamiento durante 10 minutos a 100 OC, cuya presencia se detecto por la lectura de la absorbancia en un espectrofotómetro determinada a través de un barrido con una solución patrón de glucosa de 10 mM (mg/ml) a diferentes longitudes de onda y empleando agua como blanco.
Luego se prepararon soluciones patrón de glucosa de diferentes concentraciones en un rango de 0 hasta 40mM con el objeto de obtener la curva de calibración y así determinar con esta curva los miliequivalentes de glucosa formados por la degradación del soporte papel.
Se determino el error fotométrico del instrumento haciendo lecturas con una solución
La curva de calibración del método, se prepararon soluciones de glucosa de diferentes concentraciones a partir de una solución patrón de 40 mM (mg/ml) y se aforo a un volumen de 50 ml con agua destilada, tal como se indica en la tabla 1.
Tabla 1. Preparación de soluciones de glucosa de diferentes concentraciones a partir de una solución patrón 40 mM
Tubo
Concentración mMde glucosa
Agua destilada ml
Glucosa 40 mM (ml)
Blanco
0
50
0
1

2


47,5

2,5
2
4
45
5
3

6


42,5

7,5
4
8
40
10
5

10

37,5
12,5
6
20

25

25
7
40

0

50
CONCLUSIONES Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
- Determinación de la longitud de onda de absorción del producto de reducción del DNS.
[Escribir texto]
La longitud de onda de absorción del producto obtenido de la reducción de la glucosa con el DNS se realizo desde una longitud de onda de 500 a 700 nm. La Longitud de onda de mayor absorción del producto fue obtenida por interpolación de la curva obtenida del espectro de absorción del complejo, que dio como resultado 570 nm. Esta longitud de onda es la empleada para la lectura de las demás soluciones patrón de glucosa a diferentes concentraciones.
Curva de calibración para patrones de glucosa por el método de DNS.
La curva de calibración obtenida para el método de cuantificación de GLUCOSA por el método de DNS, presenta una tendencia lineal donde se aplica a la Ley de Beert que representa la relación entre la absorbancia y la concentración del complejo obtenido por la reducción de la glucosa con el DNS directamente proporcional. El coeficiente de correlación de esta curva de calibración encontrado es de 0,9972, este valor nos indica que los datos se ajustan a una línea recta. La pendiente de la grafica relaciona el coeficiente de extinción molar la sensibilidad del método analítico, se expresa en unidades de concentración y está asociado cambio mínimo de glucosa que puede detectar el instrumento, este valor corresponde a 0,0934 mg/ml.
El límite de detección calculado para el método es de 0,5390 mg/ml que es la concentración mínima detectable de glucosa detectable por este método y un límite de cuantificación máximo de glucosa de 1,7669 mg/ml.
[Escribir texto]
Posteriormente de haber sido evaluada la curva de calibración, se construyó la respectiva curva de Ringbom, obteniéndose un intervalo lineal en todo el rango de concentraciones de las soluciones preparadas entre 1 a 10 mM para una longitud de onda de 570 nm, esto indica que es el intervalo optimo que se puede determinar glucosa por el método de DNS.
Es necesario adaptar este método en pruebas de soporte papel de tipo indsutrial y manual con y sin envejecimiento.
BIBLIOGRAFÍA
1. Skoog, D.; West, D. Química Analítica. Sexta edición. México. 1995. p 68-69,78-83, 550-559.
2. Clavijo, A. Fundamentos de Química Analítica. Equilibrio Iónico y Análisis Químico. Universidad Nacional de Colombia sede Bogota ́. Primera edición. Bogota, 2002. p. 58-60.
3. Miller, J. J, Miller. Estadística y Quimiometría para Química Analítica. Cuarta Edición. Prentice Halll. Madrid. 2002. p 125.
[Escribir texto]
4. Thompson M (2002). Harmonized Guidelines for Single Laboratory Validation of Methods of Analysis. Pure Appl. Chem. 74 (5): 835-855.
5. Vessman J (2001). Selectivity in analytical chemistry. Pure Appl. Chem. 73 (8): 1381- 1386.
6. Taylor J K (1983). Validation of Analytical Methods. Anal Chem.55 (6): A601 – A608.
7. Moreno R, Mañas J. “Métodos y estrategias para el muestreo de contaminantes
químicos” Consejo Colombiano de Seguridad, Bogota, 1989.
8. http://www.uco.es/dptos/bioquimicabiolmol/pdfs/31%20INVERTASA%20ENSAYO.pdf
ANEXO 1 PREPARACIÓN DE REACTIVOS
Reactivo de DNS. Acido 3,5-dinitrosalicílico (C7H4N2O7; PM 228,1) al 0,1 % (p/v),
tartrato sódico potásico [NaK(COO)2(CHOH)2⋅4H2O; PM 282,23] al 30 % (p/v) en NaOH
(PM 40) 0,4 M. Disolver 1 g de ácido 3,5-dinitrosalicílico y 300 g de tartrato sódico potásico en 200 ml de hidróxido sódico 2 M (16 g de NaOH en 200 ml de agua destilada) y diluir hasta 1000 ml con agua destilada. El reactivo debe guardarse en bote oscuro (color topacio), siendo estable durante varias semanas.
Solución de glucosa (C6H12O6, PM 180) 40 mM en agua destilada. Disolver 1,8 g
deglucosa en 250 ml de agua destilada. La solución, cuando no se esté utilizando, se guardará en frío.
[Escribir texto]
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