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Solubilidad De lípidos, Tinción Con Sudan III


Enviado por   •  9 de Septiembre de 2011  •  2.772 Palabras (12 Páginas)  •  14.679 Visitas

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OBJETIVOS

Objetivo General:

 Conocer la solubilidad de diferentes tipos de lípidos en disolventes orgánicos y agua, así como observar la presencia de lípidos en la leche por medio de una coloración.

Objetivos Particulares:

• Conocer el fundamento de lípidos y los tipos que existen.

• Demostrar la solubilidad de los lípidos en solventes orgánicos e insolubilidad en solventes inorgánicos.

• Aprender el fundamento de la coloración de Sudan III.

• Determinar la presencia cualitativa de los lípidos mediante la tinción con Sudan III.

INTRODUCCIÓN

Los lípidos del griego lipos=grasas son mezclas de esteres de ácidos grasos por ellos se denominan glicéridos. Los lípidos son biomoleculas orgánicas formadas por carbono, hidrogeno, oxigeno, nitrógeno, fosforo y azufre, son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es inestable, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de la grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa por encima del agua.

Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgánicos, como el éter, el cloroformo, acetona, benceno, etc. Su solubilidad en alcoholes, dependerá del tamaño del mismo así como de su ramificación y la presencia de grupos polares.

Sus principales características son un calor especifico bajo, requieren poca temperatura para mover sus moléculas, su punto de ebullición es bajo y es consecuencia del calor especifico.

Las funciones de lípidos son de:

Función de reserva: Son la principal fuente de reserva, debido a que producen en general el doble de energía de otros compuestos como carbohidratos y proteínas.

Función estructural: Forman a las bicapas lipidicas de la membrana, recubren órganos, dan consistencia a algunos organismos y protegen mecánicamente a unas superficies, como palmas de pie y manos.

Función catalizadora: favorecen algunas reacciones químicas; por ejemplo las vitaminas lipidicas o liposolubles; las hormonas esteroideas y las prostaglandinas.

Función transportadora: Transportan a otros lípidos desde el intestino, hasta el hígado.

La técnica del Sudán III es un método utilizado fundamentalmente para demostrar la presencia mediante tinción de triglicéridos, aunque también tiñe otros lípidos Pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que son aquellos que no tienen afinidad por estructuras ácidas o básicas. Son insolubles en el agua y tiñen aquellas sustancias que tienen un poder de disolución superior al del líquido empleado para preparar la solución colorante.

MATERIAL:

1 Gradilla

8 Tubos de ensaye

4 Pipetas de 10 ml

4 Pipetas de 5 ml

1 Espátula

1 Vidrio de reloj

4 Perillas

1 Mechero

1 Pinza para tubo de ensaye

REACTIVOS:

4 ml de Éter de petróleo

4 ml de cloroformo

1 ml de HCl 50%

16 ml de agua destilada

4 gotas de Sudan III

SUSTANCIAS:

8 ml de aceite

6 gr de mantequilla

2 ml de leche

PROCEDIMIENTO

Solubilidad de lípidos:

1.- Colocar en 3 tubos de ensaye 2 ml de aceite (en cada tubo)

2.- Colocar en 3 tubos de ensaye 2 gr de mantequilla (en cada tubo)

3.- Añadir 2 ml de éter a un tubo con aceite

4.- Añadir 2 ml de éter a un tubo con mantequilla

5.- Añadir 2 ml de cloroformo a un tubo con aceite

6.- Añadir 2 ml de cloroformo a un tubo con mantequilla

7.- Añadir 2 ml de agua a cada tubo restante (uno con aceite y otro con mantequilla)

8.- Agitar y anotar los resultados

Coloración de Sudan III:

1.- Poner 2 ml de aceite en un tubo. Añadir 2 ml de agua y dejar reposar

2.- Una vez formadas las dos fases, dejar caer unas gotas de Sudan III y agitar

3.- Dejar reposar el tubo y anotar los resultados

4.- Colocar 2 ml de leche en un tubo, verter 10ml de agua, unas gotas de Sudan III y agitar fuertemente

5.- Observar que se tiñe todo de rosa. Si añadimos 1 ml de HCl al 50% y calentamos aparecerán, dependiendo del tiempo de reposo, dos o tres fases:

• Una superior de color rosa oscuro, formada por las grasas teñidas

• Una intermedia con agua y lactosa disuelta

• Una inferior, con las proteínas desnaturalizadas

OBSERVACIONES

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