Practica De Bioquimica

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO

Campus Irapuato-Salamanca

División Ciencias de la Vida

Manual de Prácticas de Bioquímica

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona

Dra. Guadalupe Ortiz

Dr. Rubén Salcedo-Hernández

Manual de Prácticas de Bioquímica

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona

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INTRODUCCION

La mayoría de las técnicas experimentales y conocimientos que se han

adquirido en otros cursos son muy valiosas en el laboratorio de Bioquímica. En

este laboratorio raramente se aíslan productos en gran escala, mas bien, se

trabaja con miligramos o con microgramos. Los conocimientos metodológicos

para estudiar las biomoléculas avanza a grandes pasos y en la mayoría de las

ocasiones se requieren reactivos y equipos costosos, por lo que es mas que

imposible abarcar la extensa gama de conocimientos relacionados con protocolo

bioquímicos.

El manual de Bioquímica lo hemos preparado con algunas prácticas sencillas, y

representativas, que intentan explicar algunas de las propiedades de la

biomoléculas y técnicas para estudiarlas. Se espera que el estudiante adquiera

los conocimientos necesarios para entender cursos posteriores que pudiera

tomar durante la licenciatura o bien en algún postgrado dentro del área biológica.

Expresamos nuestro más sincero agradecimiento a los alumnos Tania

Amaral Naranjo (Ingeniería en Alimentos) y Euleterio Carrillo Serna (Ingeniería

Agrícola), quiénes durante su Servicio Social Universitario colaboraron de

manera extraordinaria en la preparación del presente manual. Finalmente, un

profundo reconocimiento a las sugerencias hechas por los alumnos quienes han

tomado el curso de Bioquímica en nuestro Instituto.

Manual de Prácticas de Bioquímica

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona

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INDICE DEL CONTENIDO

Página

Introducción 2

Prácticas

1.Guía breve para el trabajo en el laboratorio de Bioquímica y reporte

de prácticas

4-5

2. Determinación del pH y preparación de soluciones amortiguadoras 6-9

3. Separación de plásmidos en geles de agarosa 10-11

4. Determinación del tamaño de un fragmento de DNA clonado en un

plásmido

5. Aislamiento de plásmidos de Escherichia coli mediante

minipreparaciones

12-13

14-15

6. Propiedades iónicas de los aminoácidos 16-18

7. Identificación de aminoácidos y proteína 19-21

8. Cromatografía en capa fina y/o papel 22-24

9. Solubilidad y desnaturalización de proteínas 25-26

10. Determinación aproximada del punto isoeléctrico 27-28

11. Métodos espectofotómétricos y determinación de proteínas 29-31

12. Actividad de la amilasa sobre el almidón 32-34

13. Identificación de carbohidratos 35-38

Manual de Prácticas de Bioquímica

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona

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Práctica No.1

Guía breve para el trabajo en el laboratorio de Bioquímica y

reporte de prácticas

Seguridad en el laboratorio

Deben tenerse presente las reglas generales de seguridad. Se debe estar

conciente que los reactivos utilizados en el laboratorio son potencialmente

tóxicos, irritantes o inflamable. Sin embargo estas sustancias son peligrosas solo

cuando no se manipulan correctamente.

Limpieza del material de vidrio

Los resultados de los experimentos, dependen en gran parte, de la limpieza del

equipo: 1) muchos reactivos se usan en miligramos o microgramos, por lo tanto

cualquier contaminación,podría contribuír a un porcentaje significativo de la

muestra experimental total del experimento. 2) Muchas sustancias son sensible

a uno o más contaminantes, como iones metálicos, detergentes o residuos

orgánicos.

La libreta de laboratorio

Es muy importante hacer un diagrama de flujo antes de iniciar la sesión. Los

procedimientos, detalles, observaciones y resultados se deben registrar en una

libreta de laboratorio mientras el experimento se esta llevando a cabo.

Guía breve para el reporte de práctica

Introducción

Breve resumen de conceptos y/o importancia del tema. La información debe

tener relevancia para la práctica y no debe ser una copia de un libro o de

internet.

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