Actividad Enzimatica

PRÁCTICA No. 3

ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

ACCIÓN DE LA CATALASA Y LA AMILASA Y FACTORES QUE INFLUYEN EN SU ACTIVIDAD

1. OBJETIVOS:

• Estudiar experimentalmente el modo de acción de la catalasa y la amilasa sobre los respectivos sustratos.

• Analizar la manera como influye la temperatura y el pH sobre la actividad enzimática de la catalasa y la amilasa.

2. FUNDAMENTO TEÓRICO:

Las enzimas son moléculas principalmente de naturaleza proteica, cuya función es acelerar las reacciones químicas en los seres vivos, disminuyendo la energía de activación propia de cada reacción que se lleva a cabo a nivel celular, es decir actúan como catalizadores.

De manera general las enzimas presentan las siguientes características:

• Son proteínas globulares, con una estructura cuaternaria.

• Son de elevado peso molecular.

• Son específicas para cada sustrato ( El sustrato corresponde a la sustancia química sobre la cual van a actuar)

• El sustrato se une a la enzima a través de numerosas interacciones débiles como son: puentes de hidrógeno, electrostáticas, hidrófobas, entre otras, en un lugar específico, denominado sitio activo. Este centro es una pequeña porción de la enzima, constituida por una serie de aminoácidos que interaccionan con el sustrato. La figura 1 representa el sitio activo de la enzima.

Figura 1. Representación de una enzima, sitio activo y sustrato.

• El sustrato se une al sitio activo y forma un complejo enzima sustrato, como se representa en la figura 2.

Figura 2. Representación del complejo enzima-sustrato..

• No se consumen durante la reacción química

• La nomenclatura de las enzimas se basa en el nombre del sustrato atacado, o en el tipo general de sustrato, o en la reacción catalizada y se ha añadido convencionalmente, la terminación -asa. Sin embargo, existen algunas enzimas que no presentan esta terminación, como por ejemplo la pepsina y la papaina, entre otras.

• La actividad enzimática se ve afectada por factores como el pH, temperatura, concentración de sustrato y concentración de la enzima.

Ejemplo de enzimas:

• Amilasa salival: El almidón es un polímero constituido por cientos de moléculas de glucosa unidas por enlaces glucosídicos. Estos enlaces se rompen por reacciones de hidrólisis y en presencia de la enzima amilasa, transformando finalmente el almidón en varias moléculas de maltosa (disacárido formado por dos moléculas de glucosa). La amilasa esta presente en la saliva (amilasa salival) o en el jugo pancreático (amilasa pancreática).

Catalasa: El peróxido de hidrógeno es un producto metabólico de las células y es altamente oxidante, lo cual ocasiona la muerte celular. Por esta razón, las células lo deben convertir en productos inocuos como son el agua y el oxígeno. Esta reacción a nivel celular se da por acción de la catalasa, teniendo en cuenta la siguiente reacción.

3. METODOLOGÍA

3.1 Reactivos y materiales a utilizar:

Reactivos Materiales

Reactivo de Lugol

Solución de almidón 1%

Solución de peróxido de hidrógeno al 10%

• Sustancias que se deben traer:

• ¼ de libra de hígado de res

• 1 papa

• 1 Champiñón

• 10 ml de saliva. Gradilla y tubos de ensayo

Pinza para tubo de ensayo

Pipeta

Pipeteador

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