Leer Ensayo Completo Precipitacion De Proteinas

Precipitacion De Proteinas

Imprimir Documento!
Suscríbase a ClubEnsayos - busque más de 2.043.000+ documentos

Categoría: Ciencia

Enviado por: Jillian 04 mayo 2011

Palabras: 1582 | Páginas: 7

...

separación y purificación de proteínas particulares a partir de mezclas complejas.

Comúnmente se usa sulfato de amonio (NH4)2SO4 para tal fin, a causa de su gran solubilidad. La adición gradual de ésta sal permite el fraccionamiento de una mezcla de proteínas, las cuales son precipitadas pero no desnaturalizadas, entonces un exceso de agua, por encima del punto de precipitación, permite solubilizar nuevamente las proteínas”.2

>Por disolventes orgánicos:

“Se usan solventes orgánicos en el procesamiento de alimentos cuando se desea solubilizar sustratos, y para desplazar el equilibrio de algunas reacciones enzimáticas al disminuir la concentración de agua del sistema. Las proteínas disueltas en un sistema acuoso sufren cambios en su estructura tridimensional cuando son trasladadas a un sistema con un solvente distinto. Al cambiar una proteína a un sistema con disolventes orgánicos se logra un desdoblamiento o desplegamiento parcial por el rompimiento de las interacciones hidrofóbicas y puentes de H que se mantienen, pero en una estructura distinta de la nativa”.1

“Cuando una proteína se coloca en un solvente de baja constante dieléctrica la atracción entre las partículas cargadas sobrepasa a al energía cinética a la que están sujetas por la temperatura del ambiente, y se insolubilizan. Una molécula de proteína en un solvente acuoso logra disolverse mejor si tiene una distribución de las cargas más uniformes a lo largo y ancho de su superficie, y un menor momento dipolo. Los cambios de constante dieléctrica al cambiar de solvente a la proteína modifican necesariamente las fuerza de atracción entre los residuos de las proteínas y esto explica la precipitación que sufren las proteínas cuando se añaden solventes miscibles, como metanol o etanol, a las soluciones acuosas de proteínas porque la atracción entre las partículas cargadas de refuerza”1.

>Por formación de sales:

“En este factor depende si son metales pesados ó ácidos:

-Efecto de metales pesados: Las proteínas son precipitadas de sus soluciones por sales de metales pesados, por combinación del ión metálico con la forma aniónica de la proteína. Las sales que se utilizan normalmente son HgCl2 ó ZnCl2.

-Efecto de los ácidos: Las proteínas pueden precipitarse de la solución acuosa por la adición de ciertos ácidos como tricloroacético (TCA), perclórico, clorhídrico, los cuales forman sales insolubles con las proteínas”.2

>Por enzimas:

“Las enzimas se caracterizan por ser biocatalizadores, es decir, catalizadores de los seres vivos ya que ayudan a las reacciones químicas en los seres vivos, para que sucedan con más rapidez, y con mayor facilidad”.1

-------------------------------------------------

Resultados :

MUESTRA 1 Clara de Huevo | MUESTRA 2 Clara de Huevo calor | MUESTRA 3Clara de Huevo alcohol | MUESTRA 4C.Huevo/metalesAgua y cloruro de mercurio | MUESTRA 5C.Huevo/metalesAgua y nitrato de plata |

Solo la muestra de huevo. | El huevo se cuajo completamente al calentarlo | Al momento de agragar el etanol ala muestra de huevo se empezo a cuajar poco a poco, desnaturalizando la proteinas, se agito y reposo termino de cuajar 2/4( proteina cogulada) | Se agrego ala muestra de huevo agua y mercurio se agito y reposo. Se observo una precipitacion de las proteinas. | Se agrego ala muestra de huevo agua y nitrato de plata, se agito y reposo. Se observo una precipitation y una coloracion Café. |

MUESTRA 6 LECHE/ AC. CLORHIDRICO |

Se agrego ala muestra ac. Chohidrico agitando levemente. Se observo una precipitacion y alcanzo un ph 2. |

MUESTRA 150 º C | MUESTRA 237 º C | MUESTRA 330 º C |

No hubo cambios | Se observo, a los 5min y a una temperatura de 37°c cuajo la muestra.Se observo, a los 25 min la enzima empezo a actuar y se presentaron pequeños grumos. | Se observo, a los 25 min la enzima empezo a actuar y se presentaron pequeños grumos. |

Discusión de resultados :

Huevo

Clara de huevo en calor observamos que al colocarlo a temperaturas elevadas presento una precipitación esto se debe al aumentar el calor causa desplegamiento de las proteínas ya que los grupos no polares son expuestos originando la precipitación.

Al colarle alcohol a la clara de huevo se observo también una precipitación esto es porque se incremento de fuerzas electrostáticas e intermoleculares, tanto repulsivas como atractivas, esta interacciones electrostáticas provoco que la molécula se despliegue obteniendo la formación de puentes de hidrogeno que al colocar alcohol favoreció la precipitación. Debido a que la solubilidad de las proteínas se encuentra relacionada con el estado estructural esta propiedad se puede utilizar como indicador del grado de desnaturalización es por ello que al agitar la muestra de clara y alcohol observamos dos capas “desnaturalización”.

La clara de huevo y los iones de algunos metales pesados, tales como el cloruro de mercurio y nitrato de plato precipitan a las proteínas y, por lo tanto inactivan las enzimas. Normalmente, las enzimas están en suspensión dentro del citoplasma o unidas a una biomembrana. Si los iones de un metal pesado se combinan con una enzima en suspensión, la molécula proteica precipita, perdiendo su eficacia como enzima.

Leche

Leche con acido se observo una precipitación con un pH de 2, esto se debe a que el punto isoeléctrico da como efecto la precipitación de las proteínas, las cadenas laterales de aminoácidos pueden actuar como ácido o bases débiles que desarrollan funciones críticas en el sitio activo de la enzima, que dependen de su mantenimiento en un cierto estado de ionización. Por otra parte las cadenas laterales ionizadas de la proteína pueden jugar un papel esencial en las interacciones que mantiene la estructura de la proteína. Tales como observamos en la práctica donde se vio la separación de la enzimas.

La leche y la renina

La renina es un catalizador que acelera la velocidad de las reacciones químicas, sabemos que en general por cada 10ºC de incremento, la velocidad de desnaturalización se duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser proteínas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reacción hace que a la temperatura sea contrarrestada por la pérdida de actividad catalítica debió a la desnaturalización térmica, por ello al agregar la renina y exponerlas a diferentes temperaturas observamos que comenzaba a desnaturalizarse y ya que la leche es abundante en calcio tiene la propiedad de que las moléculas se junten participando en la coagulación de las enzimas. Notamos que la renina a muy altas temperaturas no produce reacción ya que la temperatura provoco la inactivación de las enzimas.

Los iones de algunos metales pesados, tales como el cloruro de mercurio y nitrato de plato precipitan a las proteínas y, por lo tanto inactivan las enzimas. Normalmente, las enzimas están en suspensión dentro del citoplasma o unidas a una biomembrana. Si los iones de un metal pesado se combinan con una enzima en suspensión, la molécula proteica precipita, perdiendo su eficacia como enzima.

Conclusion :

La desnaturalización de las proteínas es la perdida de su estructura cuando la proteína no ha sufrido ningún cambio en su interacción con el disolvente, se dice que presenta una estructura nativa , Los factores que mantienen estable una estructura proteica son: la temperatura, el pH, la concentración de sales y el solvente

La desnaturalización de una proteína hace que se pierda la conformación y por ende la actividad. La mayoría de las proteínas desnaturalizadas precipitan en solución haciendo evidente su presencia en algún medio biológico.

Las conclusiones que podemos obtener al estudiar la desnaturalización de las proteínas son:

1.- Una proteína es un polímero de aminoácidos

2.- Diversos factores estabilizan la estructura tridimensional específica (conformación) de las proteínas

3.- Los cambios de temperatura, pH, concentración de sales y solvente ocasionan la desnaturalización de las proteínas

4.- Las proteínas pueden verse como un precipitado al desnaturalizarlas

Bibliografia:

1. Badui Dergal, S. (2006). Quimica de los alimentos. México: Pearson.

2. Jose M. Maracuya.”Bioquimica orgánica”. España