Cromatografia De Papel. Separación De Una Mezcla.

Resumen 

En la presente práctica se separaron los componentes de una muestra problema la cual fue la muestra C. El procedimiento utilizado fue la cromatografía de papel, se comenzó sembrando 7 gotas en la línea inferior de un papel cromatográfico con el uso de capilares, 2 de las gotas pertenecían a la muestra estudiada y las otras 5 fueron de los siguientes indicadores: Rojo de fenol, amarillo de alizarina, azul de bromotimol, fenolftaleína y púrpura de bromocresol. La muestra C estuvo formada por los indicadores Púrpura de bromocresol y Amarillo de alizarina. 

Introducción 

La cromatografía es una técnica de separación de los componentes de una mezcla presentes en una fase denominada fase móvil, cuando se mueve en relación a otra fase llamada fase estacionaria. En otras palabras, la cromatografía es una técnica de separación en la que los componentes de una fase (gas o líquida) se separan entre sí al hacerlos pasar a través de otra fase (sólida o líquida). Fue descubierta por el botánico ruso Mikhail Tsvett en 1903 y en griego “chromatography” significa “escrito en color” [1]. 

La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que no se excluyen mutuamente: 

Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que puedan ser usados posteriormente. 

Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas. 

Existen varios tipos de cromatografía los cuales dependen del estado de la fase móvil y estacionaria. Una clasificación rápida es la siguiente: Cromatografía de columna y cromatografía de superficie plana. La cromatografía de superficie plana comprende la cromatografía de papel y la de capa fina; y la cromatografía de columna abarca la cromatografía de líquidos, de gases y de gases súper críticos (gases que exceden temperatura y presión crítica). 

La cromatografía de papel o ascendente es la más fácil de realizar. La fase estacionaria está comprendida por el papel de cromatografía y la fase móvil es un solvente o una mezcla de solventes. Se requiere además de un recipiente cerrado y de una cantidad de eluyente el cual debe ser escogido de manera que existan diferencias de solubilidad entre los componentes de la mezcla, para poder obtener una buena separación [2]. 

La separación de una mezcla por medio de la cromatografía de papel se basa en la retardación selectiva, ya que cada componente de la mezcla al separarse es retardado respecto al avance del eluyente, dependiendo de su solubilidad en este. Se define el factor de retardación (Rf) como: 

(Ec 1) Rf = distancia recorrida por el compuesto en el tiempo 

distancia recorrida por el eluyente en el tiempo 

Por lo anteriormente dicho el Factor de retardación no puede ser igual a 1. 

Procedimiento experimental 

Sobre un papel de cromatografía de dimensiones 10x20 cm se trazaron dos líneas paralelas, una a 1 cm del borde superior y la otra a 1 cm del borde inferior. Sobre la línea inferior se trazaron 7 puntos equidistantes donde posteriormente se sembraron en cada uno de ellos, gotas de diámetros inferiores a 4 mm en el orden siguiente: 

. . . . . . .

RF AA C AB F C PB 

Donde: 

RF: Rojo de fenol 

AA: Amarillo de alizarina 

C: Muestra C 

AB: Amarillo de bromotimol 

F: Fenolftaleína 

PB: Púrpura de bromocresol 

Luego se deja secar el papel mientras se procede a realizar el paso siguiente. 

Se transfirieron 20 ml del eluyente (el cual fue el 2-butanol/NH3) a un beaker de 600 ml y se tapó con en vidrio de reloj, esperando el tiempo suficiente para que los gases saturaran el beaker. Luego se dobló y engrapó el papel en forma de cilindro de manera que no se solaparan los bordes, y se insertó en el beaker cuidadosamente, percatándose de que el cilindro no tocara las paredes de vidrio, y que el eluyente no sobrepasara la línea inferior trazada en el papel. 

Una vez que el eluyente llegó a la línea superior del papel sin sobrepasarla, se retiró del beaker y se desengrapó para luego extenderlo sobre un beaker con amoníaco. Se trazaron puntos en el centro

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