La forma de las enfermedades degenerativas de la retina

Las mutaciones en el factor de transcripción de fotorreceptores de conos y bastones homeobox (CRX) se han identificado en pacientes con varias formas de enfermedad degenerativa de la retina. Para investigar los mecanismos por los cuales estas mutaciones causan la degeneración de los fotorreceptores, CRX construcciones que representan once mutaciones conocidas, así como un conjunto de deleciones C-terminales, se generaron y se ensayaron para determinar su capacidad de activar un reportero rodopsina-luciferasa en un ensayo de transfección transitoria de células . Para definir con más dominios funcionales, varios Gal4dbd-Crx fusiones se ensayaron de manera similar utilizando un elemento de respuesta a Gal4 que contiene promotor heterólogo. Este análisis demostró que la región C-terminal, entre los aminoácidos 200 y 284, es esencial para CRX-mediada por la activación transcripcional. Consistente con esto, cuatro mutantes que llevan truncamientos C-terminales demostraron una reducción de la activación transcripcional. Confirmando la importancia del homeodominio (HD), cuatro de los cinco mutantes que llevan mutaciones de sentido erróneo HD muestra la actividad alterada de transactivación, ya sea disminuido (tres) o aumentada (uno). In vitro de proteínas de ADN vinculante ensayos (EMSAs) con CRX-HD péptidos que representan los tres mutantes de alta definición con disminución de la actividad de transactivación, indicó que la alteración se debió a la reducción, pero no abolido, el ADN vinculante a los objetivos CRX. En conjunto, estos resultados apoyan la hipótesis de que las mutaciones CRX involucrado en acto humano degeneración de los fotorreceptores por perjudicar el CRX-mediada por la regulación transcripcional de los genes fotorreceptores. Sin embargo, una clara relación entre la magnitud de la anomalía bioquímica y el grado de severidad de la enfermedad no se observó, lo que sugiere que otros modificadores genéticos y ambientales también pueden contribuir al fenotipo de la enfermedad.

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