Práctica 1. Determinación De Azúcares Reductores Y Proteínas Solubles
Enviado por manu880 • 25 de Mayo de 2022 • Apuntes • 1.143 Palabras (5 Páginas) • 138 Visitas
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Laboratorio Integral De Bioquímica
Práctica 1.
Determinación De Azúcares Reductores Y Proteínas Solubles
Equipo # 5
Integrantes del equipo:
García Morales José Manuel
- INTRODUCCIÓN
Es necesario contar con métodos analíticos que permitan cuantificar componentes de las células. Los azúcares reductores poseer un grupo carbonilo libre formando un grupo hemiacetal que le confiere la característica de poder reaccionar con otros compuestos. La determinación de estos azúcares se realizó aplicando la técnica de Miller o DNS (ácido dinitrosalicílico), reactivo que tiene la capacidad de oxidar a los azúcares reductores dando resultados colorimétricos que se pueden medir con una longitud de onda de 575nm.
Estimar el contenido de proteínas es necesario y existen diferentes métodos para la cuantificación de proteínas. Muchos de estos métodos se basan en: a) la propiedad intrínseca de las proteínas para absorber luz en el UV, b) para la formación de derivados químicos, o c) la capacidad que tienen las proteínas de unir ciertos colorantes.
Método de Bradford
Se basa en la unión de un colorante, Comassie Blue G-250 (también Serva Blue) a las proteínas.
Método de Lowry
Reacción en medio alcalino con iones Cu2+, lo que reduce el reactivo de Folin-Ciocalteau y genera compuestos de color azul que absorben la luz a 750nm.
2.OBJETIVOS
Que los alumnos conozcan la técnica para la determinación de azúcares reductores y proteínas solubles por método colorimétrico y lo aplique para conocer la concentración de cada una de ellas en las muestras.
- METODOLOGÍA
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4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
- MÉTODO DE AZÚCARES REDUCTORES
Realizando lecturas espectrofotométricas por triplicado, se obtuvieron los siguientes registros de absorbancia a diferentes concentraciones:
Tubo | Volumen de la solución patrón (mL) | Volumen de agua (mL) | Volumen de DNS (mL) | Volumen total (mL) |
Blanco | 0 | 1 | 1 | 2 |
2 | 0.1 | 0.9 | 1 | 2 |
3 | 0.2 | 0.8 | 1 | 2 |
4 | 0.3 | 0.7 | 1 | 2 |
5 | 0.4 | 0.6 | 1 | 2 |
6 | 0.5 | 0.5 | 1 | 2 |
7 | 0.6 | 0.4 | 1 | 2 |
8 | 0.7 | 0.3 | 1 | 2 |
9 | 0.8 | 0.2 | 1 | 2 |
10 | 0.9 | 0.1 | 1 | 2 |
11 | 1.0 | 0.0 | 1 | 2 |
AZÚCARES REDUCTORES | ||||||
Concentración [mg/L] | Absorbancia 1 (nm) | Absorbancia 2 (nm) | Absorbancia 3 (nm) | Absorbancia Promedio | D. E | C.V % |
0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
100 | 0.003 | 0.005 | 0.001 | 0.003 | 0.002 | 66.6667 |
200 | 0.018 | 0.016 | 0.02 | 0.018 | 0.002 | 11.1111 |
300 | 0.022 | 0.019 | 0.021 | 0.021 | 0.0015 | 7.3913 |
400 | 0.047 | 0.031 | 0.04 | 0.039 | 0.0080 | 20.3919 |
500 | 0.049 | 0.067 | 0.052 | 0.056 | 0.0096 | 17.2208 |
600 | 0.096 | 0.073 | 0.099 | 0.089 | 0.0142 | 15.9228 |
700 | 0.095 | 0.092 | 0.114 | 0.100 | 0.0119 | 11.8907 |
800 | 0.12 | 0.104 | 0.108 | 0.111 | 0.0083 | 7.5241 |
900 | 0.153 | 0.147 | 0.138 | 0.146 | 0.0075 | 5.1711 |
1000 | 0.145 | 0.132 | 0.183 | 0.153 | 0.0265 | 17.2836 |
*D.E = Desviación Estándar, *C.V % =
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