Automatizacion En Hematologia

AUTOMATIZACIÓN EN HEMATOLOGÍA

INTRODUCCION

Gran parte de la práctica Del laboratorio hematológico se relaciona con observaciones que incluyen la identificación de tipos de células y la interpretación de la composición de las poblaciones celulares sanguíneas. Esta revisión describe la metodología empleada en los instrumentos automatizados para el estudio hematológico convencional, incluyendo la medición de Hb, recuento de glóbulos rojos e índices eritrocitarios, el recuento de plaquetas, el recuento total y diferencial de glóbulos blancos y reticulocitos. Se describen las diversas tecnologías utilizadas para realizar las mediciones, ejemplificando su uso en los contadores hematológicos automatizados modernos disponibles comercialmente.

Palabras claves: Automatización, Hematología, Sistemas analíticos, Tecnologías.

Muchas de las mediciones en el campo de la Hematología conciernen a variables continuas. Algunos ejemplos de este tipo de variables son la medición de concentraciones de hemoglobina (Hb) en la sangre y el hierro, así como su capacidad total de unión en suero. Por otra parte, gran parte de la práctica de la Hematología se relaciona con observaciones que incluyen la identificación de tipos de células y la interpretación de la composición de las poblaciones celulares sanguíneas. Los temas centrales que se abordarán a continuación se centrarán principalmente sobre estas determinaciones discontinuas.

En relación con el recuento de células sanguíneas, los métodos manuales son la base de algunos métodos de referencia en el laboratorio hematológico, a los que aún es necesario recurrir cuando hay discrepancia con los métodos automatizados. Suelen también ser métodos de rutina en laboratorios pequeños de algunos países, pero dada la enorme cantidad de información disponible sobre los mismos2, en este trabajo sólo nos referiremos a los métodos automatizados.

FUNDAMENTOS TECNOLÓGICOS Y SISTEMAS ANALÍTICOS EN EL RECUENTO AUTOMATIZADO DE CÉLULAS SANGUÍNEAS

A continuación trataremos sobre la metodología empleada en los instrumentos automatizados para el estudio hematológico convencional, incluyendo el recuento de plaquetas y el recuento diferencial de glóbulos blancos. El recuento de reticulocitos también será considerado porque en la actualidad puede realizarse tanto en contadores automatizados que incluyen el recuento en forma directa, o mediante un procedimiento especial previo en otros tipos de contadores (semiautomatizados).

En primer lugar, se describirán las diversas tecnologías utilizadas para realizar las mediciones, ejemplificando su uso en los contadores hematológicos automatizados disponibles comercialmente. Alguno de estos ejemplos ha sido tomado de los fabricantes que abarcan los principales segmentos del mercado de laboratorio clínico, dato obtenido a partir de la estadística de los participantes en programas de evaluación externa de calidad. Los fabricantes por lo general ofrecen un amplio rango de instrumentos, pero las descripciones serán limitadas, por razones de espacio, a los modelos más difundidos (Tabla 1).

TABLA 1 Algunas características de auto analizadores hematológicos modernos*

Tipo Fabricante Instrumento Año de aparición en US Instalados al 2000 en US

Recuento diferencial

Abbott

Cell-Dyn 1200

1999

110

de leucocitos de Cell-Dyn 1700 y 1700CS 1995 2800

2-3 regiones ABX Micros 60 1998 81

Bayer ADVIA 60 1999 50

BD Bio-sciences QBS Star 1999 Nd

Beckman-Coulter Coulter Ac-T series 1996 500

Coulter Ac-T diff y diff 2 1999 800

Coulter Onyx/Onyx AL 1994 1300

Roche KX21 1999 100

K-4500 1995 nd

De alto volumen Abbott Cell-Dyn 3200 1997 >700

Cell-Dyn 3700 1999 >300

Cell-Dyn 4000 1997 >350

ABX Pentra 60c+ 2000 0

Pentra 120 Retic 1999 18

Bayer ADVIA 120 1998 500

Beckman-Coulter Coulter GEN-S 1996 >1100

Coulter HmX 1999 >100

Coulter STKS 1989 >2600

Coulter MAXM 1991 >2100

Sysmex Sysmex SF3000-Alpha 3000 1996 100

Sysmex SF3000-Alpha 1997 nd

Sysmex SE9500/SE

Sysmex SE9500 Alpha 2

Sysmex SE9500R/SE 1994

nd

1997 350

nd

350

Sysmex XE2180/XL 2000 nd

La mayoría de estos instrumentos son totalmente automatizados, es decir las mediciones se realizan a partir de sangre entera sin necesidad de que el operador la diluya en forma manual. En efecto, con el fin de garantizar un manejo seguro, la mayoría de los instrumentos cuenta con dispositivos que atraviesan la tapa del tubo de colecta de sangre, de modo que el operador no tiene que quitarla. También es común que los instrumentos mezclen las muestras de sangre antes de que las mismas sean incluidas en el análisis. Un esquema que resume las distintas etapas de estos sistemas se presenta en la Fig. 13.

Fig. 1: Diagrama funcional simplificado de un sistema multiparamétrico de recuentos celulares.

Los contadores de sangre automatizados, como cualquier otro instrumental de laboratorio, deben ser manejados de manera apropiada. Esto requiere que sean totalmente calibrados y que el desempeño sea monitoreado tanto por el control de calidad interno como por los PEEC. Por último, debido a que el mercado evoluciona muy rápido, es necesario entender cómo se evalúan los nuevos instrumentos o, al me

nos, entender críticamente las evaluaciones emprendidas por otros usuarios. Este aspecto no será tratado en esta revisión, pero el lector puede remitirse MA Fernández Alberti y col4.

El desarrollo automatizado del recuento y la medición del tamaño de las células sanguíneas parte de técnicas de recuento simple, que fueron descriptas en la segunda mitad del siglo XIX y que fueron usadas

6 HEMATOLOGIA Volumen 9 - Nº 1, 2005

TABLA 2

Recuento de células sanguíneas en los primeros instrumentos

Características Apertura-impedancia Dispersión de luz

Descripción del prototipo Coulter, 1956 Crosland-Taylor, 1953

Ingreso de las células a la zona Pasaje a través de un orificio estrecho Pasaje por una corriente estrecha por

sensora flujo hidrodinámico

Definición de la zona sensora Medición de impedancia a través del Haz de luz que atraviesa la corriente

orificio de células

Impulsos usados para contar las Cambios en la impedancia contados Cambios en la salida de un fotómetro,

células

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