ARTICULO CIENTIFICO- BIOFILMS MICROBIANOS.

ARTICULO CIENTIFICO.

BIOFILMS MICROBIANOS.

Normalmente, se entiende por Biofilms bacteriano una colonia de células atrapadas en un matriz polimérica fabricadas por ellas mismas y adheridas a una superficie sólida. Podemos encontrar Biofilms en todos los medios donde existan bacterias: en el medio natural, clínico o industrial. Solo se requiere la presencia de un entorno hidratado y una mínima cantidad de nutrientes. Aunque la composición del Biofilms es variable en función del sistema de estudio, en general, el componente mayoritario es el agua, que puede representar hasta un 97% del contenido total. Además de agua y de las células bacterianas, la matriz del Biofilms es un complejo que está formado principalmente por exopolisacáridos.

A nivel industrial, la presencia de Biofilms  es un problema, debido que estas colonias de bacterias afectan la eficacia del proceso alimentario, disminuyendo la calidad del producto y eventualmente promover la proliferación de patógenos y resistentes a enfermedades infecciosas. Así se utilizan diversos métodos de desinfección de superficie que se basa en la adición de sustancias químicas para inactivar el microrganismo, pero en la mayoría de las ocasiones estas prácticas resultan muy poco eficaz.

En la industria a menudo existe la falta de métodos de limpieza y desinfección adecuados, en zonas de difícil acceso como lo son: codos, hendiduras, esquinas, zonas muertas, válvulas, etc. Que conllevan a la formación de estos complejos microbianos, en muchas ocasiones causando la corrosión en la tubería debido a los ácidos que segregan los complejos de Biofilms.

En este estudio el principal objetivo es investigar el efecto que produce la tensión de esquileo, bajo las cuales se formaron Biofilms microbianos  en oposición a la extracción por tratamientos químicos y mecánicos,  La combinación de acción mecánica y el tratamiento químico se utilizó para desafiar los Biofilms formados por Bacillus cereus. El  B. cereus es un contaminante industrial y un peligro de salud pública generalizado en la naturaleza y con frecuencia aislado de productos lácteos y equipo.

Biofilms se formaron a partir de una cepa bacteriana de Bacillus cereus, aisladas previamente a partir de una solución desinfectante, bajo una condiciones específicas (27 °C, pH 7 y glucosa como fuente de carbono). El cultivo de bacterias creció en un medio nutritivo concentrado estéril  (CNM) que consiste en 5 gL-1 de glucosa, 2,5 g L−1 de peptona y 1,25 g L−1 de levadura extracto, en tampón de fosfato 0.2m (KH2PO4; Na2HPO4) a pH 7. Para la formación de Biofilms,  se utilizó un medio nutritivo diluido estéril (DNM), que es una dilución de 1: 100 de la MCC en el mismo tampón de fosfato (PB).  El compuesto orgánico antimicrobiano utilizado para desafiar los Biofilms fue BENCIL DODECIL DIMETIL, el cloruro de amonio a una concentración de 300gmL−1.

Biofilms fueron cultivadas en cilindros de acero inoxidable AISI316 (SS), de superficie 34.6 cm2 mediante un cilindro reactor de rotación (5 L) (RCR). El cultivo bacteriano de B. cereus creció en un quimiostato de 0.5 L. El período de Biofilms formación y crecimiento fue 7 días, para obtener el estado estacionario Biofilms.

Para la determinación de la masa húmeda, los cilindros fueron removidos de la RCR, descartando los Biofilms de las superficies  superiores, luego se pesó los cilindros y la masa obtenida restando la masa de los cilindros limpios (sin Biofilms). La masa seca de los Biofilms se evaluó mediante el método de determinación de solidos volátiles de las suspensiones de Biofilms homogenizadas según métodos estándar.

El contenido de agua se estimó, haciendo la diferencia de la masa húmeda  y masa seca; así mismo se calculó la densidad de Biofilms con el valor de masa de Biofilms seca y el volumen de este mismo, estimado a partir de su grosor y la superficie de adherencia.

Para determinar la densidad total de las células de Biofilms, una alícuota de la suspensión homogenizada de Biofilms fue microfiltrado a través de un Nucleopore de 0.22 µm de membrana de policarbonato negro. Las capas de Biofilms se removieron al exponer los Biofilms en el flujo rotatorio con el aumento de presión durante 30 segundos (0.07 Pa, 0.17 Pa, 0.57 Pa)

De los Biofilms formados solo el contenido de agua fue estadísticamente igual para los tres Biofilms. Estos Biofilms fueron estaban constituidos principalmente por agua (<93 % total de la masa). A una presión mayor  aplicada durante la formación de estos complejos resulto menor espesor de los Biofilms. (P<0.05). A una presión de 0.02 Pa el espesor del Biofilms fue aproximadamente tres veces superior a las formadas bajo 0.17 Pa. De la misma forma una presión creciente causo un aumento en la densidad total de los Biofilms, volumétrica y densidad celular.

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