Calibración del Espectrofotómetro UV-VIS

Reporte 3

Calibración del Espectrofotómetro UV-VIS. (Ley de Lambert-Beer)

Resumen:

Primero se obtuvo la exactitud fotométrica preparando 6 replicas de una misma concentración con el estándar de dicromato de potasio es donde se aprendió el manejo de un espectrofotómetro UV-Vis, se registraran los datos para poder obtener la longitud onda de máxima de absorción a lo cual se prosiguió con la grafica de espectro de absorción, después se preparó un estándar con diferentes concentraciones para poder obtener la linealidad fotométrica en esta lectura se uso la longitud de onda máxima, con los datos obtenidos se grafico la curva de calibración y al final se obtuvo los limites de aceptabilidad para la exactitud tanto como la linealidad.

Objetivo:

Verificar la calibración del espectrofotómetro UV-Vis determinando la exactitud y linealidad espectrofotométrica utilizando una solución de dicromato de potasio en ácido perclórico 0.001N a 350nm.

Fundamento:

La calibración de espectrofotómetros UV-Vis se realiza por medición directa de filtros de oxido de holmio y oxido de didimio que permite evaluar la escala de longitud de onda del equipo, se utilizan filtros de densidad óptica neutra para la evaluación de escala fotométrica, ambos parámetros permiten evaluar el correcto funcionamiento del equipo.

El mejor método para probar la escala de la absorbancia y las linealidades de espectrofotómetros principalmente en la región UV, es la determinación de la exactitud fotométrica de soluciones de dicromato de potasio en acido perclórico 0.001N.

La espectrofotometría UV-Vis está basada en la Ley de Lamber-Beer, la cual establece que la absorbancia es proporcional a la concentración del cromófero presente en la muestra problema.

Las aplicaciones analíticas del comportamiento de absorción de las sustancias pueden ser cuantitativas y cualitativas. En este sentido la absorbancia esta relacionad con la concentración por la Ley de Lambert-Beer, que se expresa:

A=εbC

Diagrama de flujo:

Exactitud Fotométrica

Linealidad Fotométrica

Cálculos:

Exactitud Fotométrica

C1V1=C2V2 V_2=((50mL)(80mg/L))/(1000mg/L)=4mL

Linealidad Fotométrica

V_2=((50mL)(20mg/L))/(1000mg/L)=1mL 〖 V〗_2= ((50mL)(60mg/L))/(1000mg/L)=3mL

V_2=((50mL)(40mg/L))/(1000mg/L)=2mL V_2=((50mL)(80mg/L))/(1000mg/L)=4mL V_2=((50mL)(100mg/L))/(1000mg/L)=5mL

Discusión:

En la curva de calibración se compara con la tabla de valores de referencia usando el de 350nm.

Conclusiones:

El límite de aceptabilidad para la linealidad fotométrica dio resultados óptimos, demuestra que nuestros valores estuvieron correctos en el rango de absorbancia, así logrando la calibración del espectrofotómetro UV-Vis.

Reporte y Resultados:

Graficar el espectro de absorción del dicromato de potasio e indicar la longitud de onda de máxima absorción experimental.

Longitud de onda Absorbancia

320 0.122

340 0.361

360 0.909

380 0.64

400 0.864

Longitud de onda máxima: 360nm

Determinar la absortividad molar

C= 80mg/L = 0.08g/L

0.08 g/L=(1 mol K_2 〖Cr〗_2 O_7)/(294.18gK_2 〖Cr〗_2 O_7 )=2.72x10^(-4) mol/L

A=εbC

ε=A/bC=0.909/(1cm)((2.72x10^(-4)

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