Obtener y cuantificar antocianinas de maíz morado

EXTRACCION DE ANTOCIANINAS

PRACTICA

OBTENCIÓN y CUANTIFICACIÓN DE ANTOCIANINAS

OBJETIVO:

Obtener y cuantificar antocianinas de maíz morado.

FUNDAMENTO TEÓRICO:

ANTOCIANINAS

ANTOCIANINAS EN MAIZ MORADO Y OTROS

CUANTIFICACIÓN DE ANTOCIANINAS.

METODOS DE EXTRACION DE ANTOCIANINAS

EXTRACCION DE ANTOCIANINAS DE MAIZ MORADO.

MATERIALES Y MÉTODOS:

Metodología.

La extracción del maíz morado se realizara de acuerdo al siguiente flujo:

Diagrama de bloques cualitativo para extracción de antocianinas de Maíz morado

(Tusa)

PESADO

SECADO

MOLIENDA

Tamiz = 2 mm

FILTRADO

Etanol acidificado

EXTRACCIÓN I

pH: 2.0

TORTA

Opcional

EXTRACCIÓN II

Torta

FILTRADO

EXTRACTO

Indicar los datos resaltantes para determinar el rendimiento del proceso.

En el proceso de extracción utilice solvente con la siguiente características: Etanol acidificado, pH: 2.0, además realice pruebas sugeridas por el profesor.

Para determinar la cantidad de antocianas extraídas utilice el siguiente protocolo:

La extracción y cuantificación de antocianinas en medios alcohólicos fue reportada por Fuleki y Francis (1968). El procedimiento es el siguiente:

1. Se pesa o mide 1- 25 gr ó ml de muestra (P), luego en un erlenmeyer se adiciona 50 mL de una solución de extracción, que consiste en HCL 1.5 N: Etanol 96% (15:85), ya incorporada la muestra, se agita constantemente.

2. El erlenmeyer con la muestra y la solución ácida deben reposar en aproximadamente de 18 – 24horas en la oscuridad a 8ºC, en caso de solidos o de extracción primaria, para lograr la mayor extracción.

3. Luego se filtra con papel Watman Nº1, se enjuaga el erlenmeyer y el filtro con la solución de extracción y se enrasa a 200 mL (V1)

4. Se extrae una alícuota (f1) y se enrasa con la solución de extracción a un volumen conocido (f2).

5. Se hace un blanco en el espectrofotómetro con la solución de extracción como blanco.

6. Se guarda en oscuridad durante 30 minutos y luego se lee la absorbancia a 535nm y a 700 nm. Se determina la diferencia entre las dos absorbancia

A = A 535 nm - A700 nm

7. La absorbancia obtenidas no deben ser superiores a 0.7

El contenido de antocianinas totales se expresa de la siguiente manera:

ACNs (mg/100g bh.) = A x PM x V1 x f2

f1 x P x ï„…

Donde:

Ï es la obsortividad molar para la cianidina 3 – glucósido en medio alcohólico –ácido (ï„… = 20941 L x mol-1 x cm-1)

PM es el peso molecular de la Cianidina 3 – glucósido (PM= 449.2 gr x mol -1)

RESULTADOS

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