Actividad Enzimatica

ELEMENTOS NECESARIOS PARA LA PRÁCTICA

Materiales y equipos

Tubos de ensayo de 15 mls

Vaso de precipitado de 250 mls

Pinzas para tubo de ensayo.

Pipetas graduadas de 2, 5 y 10 mls

Caja de Petri

Espátula

Gradilla

Balanza

Plancha de calentamiento

Reactivos

Cada grupo debe llevar a la práctica los siguientes tipos de muestras: zanahoria, papa, manzana, levadura y rábano.

Cantidad Reactivo Descripción

5 mL Agua oxigenada Puro

5 mL Fehling A -----

5 mL Fehling B ------

5 mL Metabisulfitode sodio 1%

5 mL Lugol ----

8 mL Solución de almidón Solución al 5 %

4 mL HCl Concentrado

3grs Sacarosa Sólido

DESARROLLO EXPERIMENTAL

Presencia de catalasa en tejidos vegetales

Corte dos trozos de zanahoria y dos trozos de papa, introduzca cada muestra en un tubo de ensayo, ponga 3 ml de agua destilada y ponga a hervir un tubo con zanahoria y otro tubo con papa en un baño maría durante 15 minutos, pasado este tiempo deje enfriar el tubo, retire el agua y adicione 10 gotas de peróxido de hidrógeno (H2O) a cada tubo, observe y registre lo observado en la tabla N. 1.

Hidrólisis del almidón por acción de la amilasa

Marque 6 tubos de ensayo y realice las siguientes preparaciones:

- Tubos 1 y 2: 1 ml de solución de almidón

- Tubos 3 y 4: 2 ml se solución de almidón y 1 ml de saliva

- Tubos 5 y 6: 1 ml de solución de almidón y 1,5 ml de HCl

Deje los tubos en reposo durante 30 minutos y adicione a los tubos 1,3 y 5; 0,5 mls reactivo de Fehling A y 0,5 mls de Fehling B y a los tubos 2,4 y 6 lugol. Reporte las observaciones en la tabla N. 2

Hidrólisis de la sacarosa por la glucosidasa de las levaduras

Disuelva 2 gr de levadura en 20 ml de agua destilada, deje reposar esta mezcla durante 15 minutos, filtre la mezcla y el líquido resultante es el extracto de levadura.

Prepare los siguientes tubos:

Tubo A: 1 gr de sacarosa más 5 ml de agua y agitar

Tubo B: 1 gr de sacarosa más 5 ml de agua más 3 ml de extracto de levadura y agitar

Adicione a cada tubo una reacción de Fehling y anote los resultados.

RESULTADOS

Presencia de catalasa en tejidos vegetales

Los tejidos vegetales (zanahoria y papa) (imagen 1) (tabla 1) que se llevaron al baño maría obtuvieron una reacción negativa al agregarle el peróxido de hidrógeno H202 debido a la alta temperatura a la cual fueron expuestas, no presentaron efervescencia y se desnaturalizaron.

Imagen N. 1 tejidos vegetales (zanahoria y papa) en baño maría y a temperatura ambiente.

Y los tejidos vegetales (papa y zanahoria) (imagen 1) (tabla 1) que se dejaron a temperatura ambiente obtuvieron reacción positiva debido a que no fueron expuestas a altas temperaturas por lo tanto no hubo mayor alteración en su estructura presentando efervescencia.

Tabla 1. Acción de la Catalasa

Sustrato Reacción con el H2O2

Papa hervida -Desnaturalizo, sin efervescencia

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