Celulas mitosis

I. INTRODUCCIÓN:

OBJETIVOS:

- Identificar células interfásicas y mitóticas en tejido meristemático de Allium cepa

“cebolla” - Determinar el Índice Mitótico

II. MATERIALES Y METODOS:

Materiales: - Bulbos de Allium cepa “cebolla” con raicillas

jóvenes - Mechero - Pinzas - Ácido acético 50% -

Navajas - HCl 1 N - Papel filtro - Orceína - Pincel -

Lamina de reloj - Laminas porta y cubreobjetos - Tubos

de ensayo - Microscopios - Mechero

Métodos:

A. Células interfásicas y mitóticas

Obtención de meristemos

• Con un bisturí cortar las raicillas secas de un bulbo de cebolla y luego colocar en

recipiente con agua. El agua solo debe cubrir hasta la placa basal del bulbo de

cebolla.

• Dejar por tres días o hasta observar crecimiento de las raicillas (3 cm)

Preparación de los meristemos

• Cortar con una navaja de 3 o 4 raicillas de cebolla de 1 cm. de longitud.

• Colocar las raicillas en un tubo de ensayo con ácido acético al 50% por 20 minutos

o HCl 1N por 8 minutos.

• Colocar las raicillas en una luna de reloj y cubrirlas con orceína

• Realizar el calentamiento con un mechero, hasta la emisión de vapores, y dejar

enfriar por 5 min. Repetir el calentamiento dos veces más.

• Pasar dos o tres raicillas a una lámina portaobjetos y realizar un corte de 2 o 3

mm. a nivel del ápice. Desechar el resto.

• Cubrir los cortes de meristemo apical con una gota de colorante y colocar el

cubreobjetos. • Presionar con el dedo pulgar el cubreobjetos para extender el

preparado y disgregar las células. Con papel filtro eliminar el exceso de colorante.

Observación al microscopio

• Enfocar al microscopio a menor aumento y a 40X ( aumentos totales 400x)

• Identificar las fases de la mitosis.

B. Índice mitótico

• contar 100 células clasificándolas en interfásicas y mitóticas..

• Con los datos obtenidos calcular el Índice Mitótico de la población celular del

meristemo de raíz de Allium cepa.

III. RESULTADOS:

Esquematizar las fases de la mitosis y llenar la siguiente tabla:

Para poder tener las muestras y observar las células en distintas fases, usamos la

raíz de una cebolla y cortamos varias raicillas y las pusimos en un tubo de ensayo

junto con ácido acético por varios minutos. Después, las colocamos en una luna de

reloj y las cubrimos con orceína, encendemos el mechero y las calentamos hasta

que veamos vapores y las dejamos enfriar por 5 min y volvimos a hacer el mismo

procedimiento por dos veces.

Luego cortamos las raicillas en la punta, aproximadamente 2mm o 3mm y esa parte

las colocamos en una lamina portaobjetos y le aplicamos colorante, luego con una

laminilla la colocamos encima y apretamos con el pulga para que se extienda en

toda la lamina y por ultimo quitamos lo excesos.

Para el conteo de celulas:

Interfase Profase Metafase Anafase Telofase Total

N° de

células

1 3 4 2 2 12

Porcentaj

e

8.3% 25% 33.3% 16.7% 16.7% 100%

IM= 12/ 1+12 x 1OO

IM= 92.3

IV. DISCUSIÓN

El índice mitótico es una medida de la cantidad de células que están

experimentando mitosis en una población de células. Se calcula dividiendo el

número de células que están en mitosis por el número total de células en la

muestra. El índice mitótico es una medida importante en la investigación del cáncer,

ya que las células cancerosas a menudo tienen un índice mitótico más alto que las

...