DIVERSIDAD CELULAR I. CÉLULAS PROCARIÓTAS: TINCIÓN Y SU OBSERVACIÓN

DIVERSIDAD CELULAR I. CÉLULAS PROCARIÓTAS:

TINCIÓN Y SU OBSERVACIÓN

(CELLULAR DIVERSITY I. PROKARYOTIC CELLS:

STAINING AND OBSERVATION)

Barraza Y; Estrada C; Prada C; Quintero C; Romero W; Soto A

Resumen:

La célula es la unidad biológica, funcional y estructural básica de cualquier ser viviente y a la vez, la célula es el organismo más pequeño de todos, capaz de realizar las funciones de nutrición, relación y reproducción.

Todo ser vivo está formado por células.  Cuando están formados por una sola célula se les denomina unicelulares y cuando son formados por una gran cantidad de células de diferentes tipos que normalmente están especializadas en funciones específicas, reciben el nombre de multicelulares.

Se conocen dos tipos básicos de células, las Eucariotas que contienen un núcleo celular bien definido y las Procariotas que carecen de él. En general, las Eucariotas forman parte de los grandes organismos multicelulares como animales, plantas o el ser humano, mientras que las Procariotas son parte única de los organismos unicelulares como las bacterias o Arqueos.

Palabras Claves: célula procariota, bacteria, arqueo bacterias, cianobacterias, membrana celular, tinción, microorganismos unicelulares, fisiología, morfología, GRAM positiva, GRAM negativa.

Abstract:

The cell is the basic biological, functional and structural unit of any living being and, at the same time, the cell is the smallest organism of all, capable of performing the functions of nutrition, relationship and reproduction.

Every living being is made up of cells. When they are formed by a single cell they are called unicellular and when they are formed by a large number of cells of different types that are usually specialized in specific functions, they are called multicellular.

Two basic types of cells are known, the Eukaryotes that contain a well-defined cell nucleus and the Prokaryotes that lack it. In general, Eukaryotes are part of large multicellular organisms such as animals, plants or humans, while Prokaryotes are a unique part of unicellular organisms such as bacteria or Arqueos.

Keywords: prokaryotic cell, bacteria, archaebacteria, cyanobacteria, cell membrane, staining, unicellular microorganisms, physiology, morphology, GRAM positive, GRAM negative.

INTRODUCCIÓN

Las células procariotas son el grupo más antiguo de organismos sobre la Tierra, se han encontrado fósiles de más de 3.000 millones de años, así mismo|         son las más abundantes.

Su estructura es básica por lo que no forman organismos multicelulares y tienen características que las distinguen de las Eucariotas, como no poseer un núcleo definido a diferencia de las  células eucariotas que sí cuentan con un núcleo celular y separado por el citoplasma.

En el núcleo, la célula alberga la información genética. En el caso de las células procariotas, al no disponer de núcleo definido, este material está distribuido en una región del citoplasma que se conoce como nucleoide.

En la mayoría de las células procariotas es posible distinguir la pared celular, la membrana plasmática, el citoplasma (con el nucleoide), los ribosomas y los llamados compartimentos procariotas.

Los biólogos vinculan a las células procariotas con el origen de la vida y sostienen que la aparición células eucariotas posibilitó el desarrollo de organismos más complejos. El proceso que permitió la creación de las células eucariotas se llama eucariogénesis.

Hubo, según una hipótesis, un “último antepasado común universal”: LUCA, según la sigla en inglés. Este sería un organismo unicelular procariota del que descienden el resto de los seres vivientes.

La amplia mayoría de los organismos unicelulares, de hecho, siguen siendo procariontes. Las bacterias, por ejemplo, son organismos procariontes. Están formadas por células procariotas, con su material genético disperso en la zona del citoplasma.

Las arqueas son otros organismos con células procariotas. Anteriormente eran consideradas bacterias pero luego, al descubrirse varias diferencias con estos organismos, se “independizó” a este tipo de dominios en el dominio Archaea.

MATERIALES Y EQUIPOS

Microscopio óptico, láminas porta y cubre objetos, goteros, cultivo de microorganismos realizado con anterioridad, un vaso de yogurt, azul de metileno, solución colorante de cristal violeta, colorante de Gram (bacterias), violeta de Genciana, papel absorbente, aceite de inmersión, asa de inoculación punta redonda, beaker, pipeta, mechero, agua destilada, papel filtro, etanol al 95%.

PROCEDIMIENTO

Parte A. Preparación de un frotis

Comprende las siguientes etapas:

1. Extendido. 2. Secado. 3. Fijación

Se verificó que en la se entraran los materiales que se requerían (caja de Petri, asa microbiológica, beaker con agua destilada, porta objetos limpios, muestra biológica).

1. Extensión:

• Se disolvió la muestra en una caja de Petri con un poco de agua destilada y se mezcló con el asa.
• Se preparó un porta objetos limpio.
• Se introdujo el asa en el beaker con agua destilada con el fin de limpiarla y luego se flameó hasta rojo vivo; se introdujo de nuevo en el agua.
• Se tomó una muestra con el asa y  zigzagueando se colocó sobre un porta objetos limpio.

1. Secado: se mantuvo la lámina encima de llama del mechero a una distancia segura (apróx. 15 cm).
2. Fijación: con el frotis seco, se pasó el porta objetos tres veces por la llama para fijarla.

Parte B. Técnicas para la coloración de bacterias.

1. Coloración Simple:

• Se preparó un frotis con la técnica anteriormente descrita.
• Se colocó el portaobjetos sobre un soporte para tinciones.
• Se cubrió la preparación con dos o 3 gotas de solución de azul de metileno y se dejó actuar por 1 minuto.
• Se lavó con agua.
• Se secó encima del mechero a una distancia adecuada de la llama.

Con esta técnica de coloración se observó la muestra a través del microscopio óptico con diferentes objetivos, encontrando lo a continuación descrito:

1. Coloración de Gram (Técnica de Hucker)

• Se preparó el frotis según la técnica que se describió.
• Se colocó la porta objetos sobre un soporte para tinciones.
• Se cubrió la muestra con una solución de cristal violeta y se dejó actuar por 1 minuto.
• Se lavó suavemente con agua de un frasco lavador.
• Luego se cubrió con lugol y se dejó actuar por un minuto.
• Se lavó nuevamente de la misma manera.
• Después se cubrió con etanol a 95% (decolorante de Gram) y esto actuó sobre la muestra durante 30 segundos, moviendo la lámina suavemente.
• Se lavó con agua.
• Se cubrió con una solución de safranina y actuó por un minuto.
• Por último se lavó y secó.

Aplicando esta técnica de coloración se observó la muestra a través del microscopio  con diferentes objetivos, encontrando lo a continuación descrito:

Relación entre células procariotas y eucariotas.

1. Raspamos  con un palillo el epitelio interno de la mejilla de un voluntario, lo colocamos sobre el porta objetos y dejamos que se secara la muestra.
2. Se tiño con azul de metileno.
3. Después lavamos con agua destilada del frasco lavador.
4. Retiramos el exceso de agua con papel adsorbente, colocando el porta objeto sobre él, sin arrástralo.
5. Colocamos la muestra en la platina del microscopio y encontramos lo siguiente:

Enfocamos con el objetivo 4X, con este logramos ver que las células de la mucosa oral se tiñeron, pero no logran distinguirse, como se muestra en la fig. ¿

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