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El metabolismo de las hormonas durante la germinación de la semilla y el letargo.


Enviado por   •  6 de Agosto de 2015  •  Apuntes  •  1.218 Palabras (5 Páginas)  •  255 Visitas

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El metabolismo de las hormonas durante la germinación de la semilla y el letargo.

8-14C-Zeatin está ocupada rápidamente y es extensamente metabolizada por hachas removidas por incisión de frijol durante una incubación de 12 horas en 26 °C. La mayor parte de la radioactividad es encontrada en el etanol de 80 % fracción soluble y consta de zeatin, zeatin ribosa, zeatin-5’–ribotide. La cantidad total de zeatin metabolizado no es afectada por concentraciones que inhiben crecimiento de ácido abscisico o cicloheximida, la conversión para las derivadas del dihidrozeatin es reducida. Mientras la cantidad total de zeatin metabolizado no es afectada por concentraciones de ácido abscicico o cicloheximida que inhiben crecimiento, la conversión para las derivadas del dihidrozeatin es reducida. Aunque algo menos el efectivo que el zeatin y zeatin ribosa, dihidrozeatin y dihidrozeatin ribosa tambien contrarreste la inhibición del ácido abscisico inducida por el ácido de crecimiento.

Las hachas removidas por incisión de semillas de Phaseolus Vulgaris embeben agua rápidamente, experimentan una fase de atraso, y luego inician incremento fresco del peso en una tasa lineal. En los primeros 26° C. de fase de crecimiento 4 para 5 hr después de la imbibición y continúan para al menos 10 hr. Este crecimiento está inhibido por ABA y mientras se añadió exogenamente que el zeatin no afecta la tasa de crecimiento normal, eso conduce a una revocación parcial de la inhibición inducida en ABA.

8-14C-Zeatin fue sintetizado por el procedimiento de Shaw et al., 6-Chloropurine-8-14C, 4.3 mg y 7.3 mg de sulfato 4-amino-2-methyl-2-buten fueron disueltos en 0.27 ml de ml de 1 butanol y 0.03 de triethilamina. Esta mezcla fue calentada en un tubo sellado a 130 °C por 90 min. El producto radiactivo estaba apartado y purificado por cromatografia. El material aislado fue cromatograficamente homogéneo por criterios radiográficos y ultravioletas y tiene los mismos valores de Rf con espectro de absorción como zeatin.

La Incubación del Tejido Fino. La información en las características de crecimiento de hachas removidas por incisión de frijol. El medio de incubación constó de 0.05 amortiguador M HEPES, pH 7.0, contener 50 ponen guías en / ml de cloranfenicol y los compuestos experimentales. 8-14C-Zeatin fue administrado añadiéndole 97, ug en 3 ml de búfer a 1 g de hachas secas, e incubando en un tubo por 1.5 hr en 26 °C. La mezcla fue transferida para un frasco de 1 litro, 17 ml de amortiguador y el compuesto experimental se agregó, y la incubación fue con la que se continuó sacudida en 26 °C para un total de 12 hr. Este procedimiento asegura que el 8-14C-Zeatin desde las hachas embeba casi tres veces su peso de agua durante 1.5 hr. Aun en presencia de ABA o cicloheximida,

Las hachas fueron filtradas en estopilla, lavada con amortiguador Hepes, superficie desecado, y pesada. Los lavados y medio de incubación estaban combinados, contados, y cromatografiados en varios casos. Las hachas estaban molidas, el residuo fue re-extraído tres veces más. Los extractos combinados fueron concentrados debajo de 30 °C en un evaporador rotativo, y el residuo estaba ocupado en 3 ml de agua. La solución fue extraída cinco veces con porciones 1-ml de 1 butanol.

Contando Procedimientos. Los compuestos radiactivos estaban ubicados en los cromatogramas del papel por autorradiografía en Kodak. Los cromatogramas estaban cortados en al menos 25 pedazos, cada pedazo sumergido en 10 ml de fluido de centelleo, 4 g de Omnifluor por tolueno de litro..

La Caracterización de Compuestos Radiactivos. Además de las comparaciones de valores de Rf de los compuestos radiactivos para esos de estándares, varios procedimientos químicos y enzimáticos fueron usados. Los compuestos radiactivos en un área particular fueron extraídos con solventes de los cromatogramas del papel con etanol o agua al 80 %

El periodo de oxidación bajo las condiciones desarrolladas por Weith

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