Métodos moleculares

9. métodos moleculares (PCR convencional, multiplex, Real time): finalidad, utilidad, ventajas y desventajas en veterinaria (según articulo)

R/. Métodos moleculares, PCR convencional.

• Utilidad: Se usan para identificar en la cadena de ADN posibles fallas o interferencias las cuales no son propias de esta, esto se compara con controles positivos usando luego de las amplificaciones la gel de agarosa y ahí se comparara el resultado y si posee o no dicha falla que puede ser conocida como un virus, en este caso un virus que afecta a los bovinos.

• Finalidad: Amplificar secciones de un segmento de la cadena de ADN.

• Desventajas: Al ser sus resultados cualitativos no da tanta veracidad en ellos ya que se dan de acuerdo a la posición de la ubicación de sus segmentos siendo comparados con los de la tabla de control y aquí puede haber un margen de error ya que sus posiciones podrían no ser exactas y podrían ser interpretada de otra manera sus resultados.

• Ventajas: La PCR convencional fue muy usada en un tiempo en donde sus resultados eran muy buenos ya que debido a que tenían que ser comparados con una tabla de control se sabría que fallas o alteraciones podría tener el genoma dependiendo de cómo se ubicara en esta, sus resultados son cualitativos.

PCR Multiplex.

• Utilidad: Al comenzar a realizar la amplificación de un segmento del genoma sus cebadores lo hacen creando fragmentos de diferentes tamaños, lo cual permitirá la detección de los ácidos nucleicos paralelamente a partir de agentes infecciosos dependiendo del tamaño del fragmento.

• Finalidad: Detección de virus y/o bacterias.

• Desventajas: En si esta prueba no tiene muchas desventajas ya que ha sido muy útil en su objetivo el cual es detectar virus o bacterias, y no proporciona tantos gastos para la persona que la va a realizar.

• Ventajas: Disminuye para el veterinario altos gastos monetarios, ya que detecta virus y bacterias a la vez, entonces si se realiza en un animal que se tenga sospecha de una enfermedad como por ejemplo BRD detectara varios patógenos, como virales y bacterianos que podrían estar involucrados en ocasionarla, también ha servido mucho para la medicina veterinaria en fines investigativos.

PCR real time.

• Utilidad: Esta prueba es usada en laboratorios de diagnóstico veterinario, consiste en emitir fluorescencia para cuando la ADN polimerasa este en proceso de replicación, esta pasa por la sonda y aquí se emite la fluorescencia.

• Finalidad: Crear amplificaciones de una cadena de ADN y por medio de la ADN polimerasa y la zona Taq Man brindar fluorescencia para emitir un resultado en el tiempo exacto.

• Desventajas: Una de las desventajas de esta prueba es que da muchas copias de la cadena de ADN y así entonces el agente infeccioso por cadena será menor, entonces la especificidad de los cebadores y la longitud del producto de PCR amplificado puede alterar la eficacia de la reacción y alterar el valor de la señal fluorescente, debido a esto se deberá ser consiente por parte de cada laboratorio en donde se esté realizando esta prueba la correcta interpretación de los resultados sean positivos o negativos

• Ventajas: Esta PCR ha sido muy usada últimamente y ha dejado atrás a la PCR convencional, ya que esta real time proporciona resultados más confiables ya que son cuantitativos es decir exactos, y la PCR convencional da resultados que dependen de cualidades de posición, también otra ventaja a cerca de la realización de esta

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