AISLAMIENTO DE GRAM POSITIVAS STAPHYLOCOCUS AUREUS

AISLAMIENTO DE GRAM POSITIVAS STAPHYLOCOCUS AUREUS

Resumen

El Staphylococus aureus también conocida como staphylococus dorada es un coco Gram positivo, el cual es inmóvil y bacteria anaeróbica facultativa (se desarrollan tanto en presencia como en ausencia del oxígeno), es no espatulada y produce catalasa, coagulasa. El objetivo de nuestra practica de laboratorio fue el de estudiar la presencia de staphylococus aureus en el queso, esto con la ayuda del Agar Manitol Salado el cual es un medio de cultivo selectivo para bacterias Gram positivas, se realiza el método de tinción de Gram y la prueba de catalasa. En nuestros medios de cultivo se desarrollaron muy pocos staphylococus ya que en gran parte se desarrollaron bacterias Gram negativas en forma de bacilos posiblemente salmonela.

Palabras clave: Staphylococus aureus, anaeróbica, gram positiva, gram negativo, agar manitol salado, salmonela

Abstract

Staphylococcus aureus, also known as golden staphylococcus, is a Gram-positive coccus, which is immobile and facultatively anaerobic bacteria (they develop both in the presence and absence of oxygen), is non-spatulate, and produces catalase, coagulase. The objective of our laboratory practice was to study the presence of staphylococcus aureus in cheese, this with the help of Salted Mannitol Agar which is a selective culture medium for Gram positive bacteria, the Gram stain method is performed and the catalase test. In our culture media, very few staphylococci were developed since Gram-negative bacteria in the form of possibly salmonella bacilli were developed to a large extent.

Key words: Staphylococcus aureus, anaerobic, gram positive, gram negative, salty mannitol agar, salmonella

INTRODUCCIÓN

El Staphylococus aureus también conocida como staphylococus dorada es un coco (puede apreciarse parejas, cadenas o racimos) Gram positivo, el cual es inmóvil y bacteria anaeróbica facultativa (se desarrollan tanto en presencia como en ausencia del oxígeno), mide aproximadamente 0,8 a 1,5 micras, es no esporulada y produce catalasa, coagulasa, se desarrolla a una temperatura de 37°C por ello habitan la piel y la mucosa de los seres humanos, puede ingresar al torrente sanguíneo por medio de heridas  de heridas, esta tan esparcida a nivel mundial que 1 de cada 3 personas hayan adquirido esta bacteria sin darse cuenta.

Es una bacteria la cual puede afectar al aparato digestivo  o también causante de infecciones como forunculosis, conjuntivitis o foliculitis, también causa enfermedades de riesgo elevado que pueden causar la muerte como sepsis, osteomielitis, celulitis, neumonía, etc.

Normalmente el staphylococus se conbate con antibióticos como la oxicilina, la nafcilina o aminoglucosidos ya que es resistente a la penicilina.

Agar Manitol Salado:

También conocido por sus siglas en ingles MSA, es un medio de cultivo selectivo ya que permite el crecimiento de bacteria gram positivas he impide el crecimiento de bacterias gram negativas, posee elevados niveles de sal (NaCl) entre un 7,5% y un 10%, esto lo hace un medio selectivo para staphylococus ya que por la elevada presencia de sal no deja que se desarrollen bacterias gram negativas. Si el manitol es fermentado por un organismo este cambia de color  rojo a amarillo.

OBJETIVOS

• Aislar de una muestra de alimentos la bacteria staphylococus aureus
• Determinar sus características en el medio agar manitol salado
• Observar en el microscopio su morfología mediante una coloración Gram
• Determinar su capacidad de producir la enzima catalasa

MATERIALES Y MÉTODOS

• Agar manitol salado
• Placas Petri descartables
• Asa de drigalsky
• Micropipeta
• Vaso precipitado
• Alcohol-algodón
• Entre otros implementos
• Asa de kolle
• Mechero
• Microscopio
• Microscopio

PROCEDIMIENTO

1. Licuar el Agar Manitol Salado en la cocinilla hasta que esté completamente liquido
2. Diluir la muestra en solución salina fisiológica (SSF) 0.9%

1. Proceder a realizar las técnicas de siembra:

Siembra por diseminación:

• Agregar al medio de cultivo a la placa Petri aproximadamente 20 ml a una temperatura de 45°C a 50°C
• Dejar solidificar y agregar 0,1 ml de muestra diluida
• Diseminar la muestra con el asa de drigalsky

Siembra por agotamiento:

• En la placa con medio gelificado (mismo procedimiento) tomo una asada de la muestra y sembrar por cuadrantes

1. Incubar a 37°C x24hrs a 48hrs
2. Realizar la coloración de Gram y prueba de catalasa

RESULTADOS[pic 1][pic 2]

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• En la siembra por agotamiento se ve que se desarrollaron bacterias gram positivas en forma de bacilos lo cual nos indica la posible presencia de salmonela. En la siembra por dispersión se desarrollaron cocos pero en muy pequeñas cantidades los cuales fermentaron el manitol salado por ello el cambio de rojo a amarillo, y en mayor cantidad se vio bacterias gram negativas en forma de bacilos largos. No se llegó a desarrollar con éxito nuestra cepa de staphylococus aureus.

DISCUTIR

• El medio que se utilizó (agar manitol salado) estaba posiblemente caducado por ello no cumplió bien con su función y por ello no se desarrollaron los staphylococus aureus.

CONCLUSIONES

• Se ve que en cada método de siembra existen diferente número de colonias.
• Con el método de tinción de gram se vio la presencia de bacterias gram positivas y gram negativas.
• Mediante el microscopio se vio la presencia de bacilos y de cocos (en muy pequeña cantidad).
• No se pudo cultivas staphylococus aureus con éxito.

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