Análisis microbiológicos Preparaciones la muestra para análisis microbiológicos

Análisis microbiológicos

Preparaciones la muestra para análisis microbiológicos

Objetivos

• Aprender a tomar, pesar y diluir muestras para su posterior análisis
• Realizar el triturado y homogeneizado de la muestra
• Preparar diluciones seriadas para poder realizar recuentos microbianos posteriores

Material

• Balanza
• Mechero bunsen
• Pinzas y espátula
• Bolsas de muestra
• Triturador homogenizador

Preparación de la muestra

• pesada de la muestra

• En las proximidades de la llama del mechero
• Se hará en condiciones asépticas
• con materiales estériles

• Fracción de alimento

• Representativa en total de la muestra

• Diluyente

• No debe producir modificaciones cualitativas ni cuantitativas en la biota de los alimentos que van hacer analizados
• La cantidad a añadir dependerá de la dilución de la suspensión madre

• Agua triptona con sal
• Solución de ringer ¼
• Agua peptona tamponada

Triturado de la muestra

• Triturador de paleta (más utilizado en el sector alimenticio): golpea rítmicamente la mezcla de los alimentos y diluyente
• Los choques producidos por la paleta dislaceran el alimento y dejan las bacterias en suspensión
• Es necesario obtener una mezcla homogénea
• Hay que evitar la destrucción de los microorganismos ( no pasar mucho tiempo en el triturador, el tiempo dependerá del tipo de muestra)

Preparación de diluciones decimales

Material

Tubos de 9 ml de agua destilado estéril

• Pipetas puntas
• Agitador orbital
• Mechero bunsen

1. Transferir 1 ml de la suspensión madre a un tubo que contenga 9 ml de agua destilada estéril
2. A partir de la mezcla anterior, incorporar 1 ml a otro tubo que contenga 9ml de agua estéril
3. continuar así sucesivamente hasta lograr la dilución deseada

Conclusiones

• La preparación de las muestras para análisis microbiológicos exige:

• Unas reglas de manipulación asépticas muy estrictas
• La utilización de materiales y diluyente estériles

• Hay que evitar la excesiva manipulación de las muestras
• En el triturador hay que:

• Evitar la destrucción de los microorganismos por rotura de sus membranas o por calentamiento excesivo
• Obtener una mezcla homogénea para logar una distribución equilibrada de las mismas

• La serie de diluciones decimales servirá para iniciar las determinaciones en la que sea necesario obtener recuentos.
• Una vez preparada las diluciones, los análisis no deberán demorarse mas de 2 h desde la preparación la misma

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