CARACTERIZACIÓN QUÍMICA DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

LABORATORIO DE QUIMICA

1. OBJETIVOS

• Comprobar la solubilidad de la proteína albúmina, en diferentes solventes.
• Desnaturalizar la albúmina mediante diferentes agentes.
• Analizar el comportamiento de aminoácidos y proteínas en diferentes reacciones químicas

1. CONSULTA PREVIA

Consultar: la diferencia entre hidrólisis de una proteína y la desnaturalización de una proteína, así como también la composición de los aminoácidos presentes en la albúmina de la clara de huevo.

Tratamiento de residuos tóxicos como los metales pesados.

1. FUNDAMENTO TEORICO

Aminoácidos: son compuestos orgánicos que contienen grupos amino y carboxílicos en la misma molécula, por lo tanto, poseen propiedades ácidas y básicas. De los 22 o más aminoácidos encontrados en una proteína casi todos son alfa-aminoácidos.

Desnaturalización: Es el cambio del ordenamiento de la estructura tridimensional ordenada de la molécula nativa a otro de una configuración más desordenada.

Durante la desnaturalización se rompe los puentes de hidrogeno y hay un incremento en el grado de desorden de la molécula con pérdida de la actividad biológica. En la mayoría de los casos no es posible restituir las proteínas su estado nativo luego de haber sido desnaturalizada.

Agentes desnaturalizantes: Estos pueden ser de varias clases, entre ellas se encuentran:

1. Físicos: Calor, luz, presión, congelamiento, rayos X, rayo ultravioleta, ultrasonido y agitación mecánica.
2. Químicos: Solventes orgánicos: alcohol, éter, acetona, etc.
3. Bases orgánicas: Amidas y urea.
4. Detergentes.
5. Valores de pH altos o muy bajos.
6. Sales de metales pesados (Hg y Pb).
7. Ácidos fuertes: Tricloroacético, perclórico, sulfúrico, clorhídrico.
8. Bases fuertes.
9. Biológicos: Enzimas proteolíticas.
10. Las proteínas desnaturalizadas tienen a formar agregados moleculares y se precipitan. Esto se conoce con el nombre de coagulación.

Reacciones químicas: Los aminoácidos como unidades constitutivas de las proteínas, contienen una gran cantidad de grupos químicamente activos, lo que hace que una proteína tenga una amplía reactividad frente a compuestos orgánicos. Esta es la base de las siguientes reacciones:

Reacción con la Ninhidrina: Los aminoácidos dan compuestos de color violeta o purpura con este reactivo.

Reacción Biuret: El sulfato de cobre alcalino reacciona con compuestos que contienen dos o más enlaces peptídicos dando un complejo de coloración violeta. La intensidad del color es una medida del número de enlaces peptídicos que contienen proteína a analizar.

Reacción Xantoproteíca: Los aminoácidos que contienen un núcleo aromático, forman nitro-derivados de color amarillo cuando se calienta con ácido nítrico concentrado y por álcali pasan a un color anaranjado oscuro.

Ensayo de Azufre: Si una solución de proteína se hierve con KOH o NaOH concentrado y luego con acetato de plomo se forma un precipitado negro, esto si en la proteína están presentes los aminoácidos cistina, cisteína y/o metionina.

Reacción de Millón: El reactivo consta de una solución de nitrato mercúrico en HNO3.         Los compuestos que componen un grupo de hidroxibenceno reaccionan con este reactivo formando compuestos de color rojo. Los aminoácidos que pueden dar positiva esta prueba son la tirosina y sus derivados.

Reacción del Ácido Glioxílico: El grupo indólico del triptófano reacciona con el ácido glioxílico en presencia del ácido sulfúrico concentrado dando color purpura. El ácido acético glacial que ha sido expuesto a la luz contiene ácido glioxílico.

Reacción de Sakaguchi: El único aminoácido que contiene grupos guanidinos es la arginina, esta reacciona con el alfa-naftol y un agente oxidante tal como el agua de bromo, dando un color rojo.

4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

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