Esterilización en autoclave y coprocultivo

Octubre del 2014

REPORTE DE PRÁCTICA.

Esterilización en el auto clave.

Preparación de las 6 cajas Petri.

1.- se envuelven las 6 cajas Petri en forma tubular con el papel estraza

2.- se recortan en cada extremo el papel estraza sobrante, dejamos lo suficiente para poder taparlo y posteriormente lo encintamos, marcando el lado de las tapas para no estropearlas.

[pic 1]

Esterilización

[pic 2]

1.-se checa la cantidad de agua a la medida

2.- se introducen las cajas Petri envueltas

3.- se cierra el autoclave en par (forma de cruz)

4.-se sube el break (el enchufe)

Se espera 1 hora a 121º a o.15 libras

Cuando haya transcurrido la hora y el autoclave suene, esperamos 15 minutos para apagarlo

5.- Se baja el break de operación y se espera a que la aguja llegue a 0

6.- Se abre en par y se saca con cuidado las cajas Petri

7.-Se extrae la olla y se vacía el agua para que no le salga sarro

8.- se tira el agua y se lava la olla.

*Una vez descubiertas las cajas Petri no se pueden abrir para no contaminarse.

Preparación del Cultivo

*Es importante que el equipo tenga puesto su cubre bocas.

-Agar Sangre

-Caldo urea

* Se realiza la regla de 3 para saber la cantidad que estamos buscando:

[pic 3]

Agar Sangre: 40g – 1000ml

                        X=?  -   250ml

[pic 4]

Caldo Urea: 3.87g – 100ml

                      X=?   - 50 ml

• Antes de pesar debemos calibrar la balanza.

Agar Sangre

1.-Se pesa el papel de base y se suma la cantidad del agar: 0.9gr del papel +10gr del agar de sangre = 10.9 gr.

2.- Se pesa la Cantidad deseada (10.9gr).

3.-En un Matraz Colocamos 250 ml de agua.

4.- Mezclamos.

5.- Se calienta hasta que este empezando a e bullir (cuando salen las primeras 2 burbujas) se cuenta un minuto y se retira cuidando que no e bulla más, y tapamos con el tapón previamente elaborado.

Caldo Urea

1.- Se pesa el papel de base y se suma la cantidad del agar: 0.9 gr del papel + 1.935gr del agar = 2.835gr.

2.- Se pesa la cantidad deseada (2.835gr).

3.-En un matraz colocamos 50 ml de agua.

4.-Mezclamos.

5.- Se introduce 3.5ml con ayuda de una pipeta en tubos de ensaye.

3 de Noviembre del 2014

Preparación del medio
*colocamos las cajas petri alrededor del mechero, sin abrirlas para no contaminarlas.

[pic 5]

-Agar Sangre
1.-Se realiza la punción venosa por método de vacotainer, se llenan aproximadamente 3 tubos de ensaye.
2.-Se vacían los 3 tubos con la muestra biológica (sangre) en el agar de sangre.
3.-Se mezcla.
4.-Con El mechero, se esteriliza la boquilla del matraz (tapa).
5.-Se vacía el agar en las cajas petri, esterilizando el matraz y el tapón en cada vaciado.
6.-Después del vaciado, se flamean las cajas petri procurando qué no quede el agar en la tapa de las cajas petri.                                                                               7.- Se tapan, y etiquetan (marcando con la fecha, cultivo, grado, grupo, mesa).                        
8.- Se apilan y se encintan volviéndolos a marcar.                                          
9.- Los llevamos a gelificar.

Noviembre del 2014

“COPROCULTIVO”

INTRODUCCIÓN

Es de reconocer la importancia de la técnica, recalcando que las enterobacterias representan la mayor parte de la flora microbiana del tracto intestinal del hombre. En ella se incluyen gérmenes comensales (Proteus y bacilos coliformes), así como patógenos del género Salmonella y Shigella . Pueden estar presentes también estreptococos intestinales (enterococos), Clostridium, levaduras (incluso Candida albicans) y ocasionalmente estafilococos patógenos. El Vibrión colérico puede ser aislado en casos de cólera; ocasionalmente es necesario tratar de aislar Mycobacterium tuberculosis en materia fecal.

MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

[pic 6]

*Para este proceso, requerimos el uso de cubre bocas, y para el manejo de la muestra, uso de guantes.
-Siembra de Bacterias.
1.-Características de la muestra:

-Examen macroscópico
Presencia de restos de comida.
Consistencia fecal: Sólida.
No tiene mucosidad.
Sin presencia de parásitos.

2.- Después del examen físico, le agregamos solución salina para poder homogeneizar la muestra.

*Para el coprocultivo, es importante mencionar qué el agar para esta muestra son:

• Agar Sangre.
• Verde Brillante.
• Salmonella Shigella.

Para el sembrado:

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