Práctica nO.4 Deshidratación e inclusión en parafina

PRÁCTICA No.4

 DESHIDRATACIÓN E INCLUSIÓN EN PARAFINA

          INTRODUCCIÓN

La deshidratación es la perdida de agua y sales minerales, continuando con la técnica histológica, después que los tejidos se han fijado se elimina el fijador y se deshidrata. Debido a que gran parte del tejido está constituido por agua, se aplica una serie gradual de soluciones acuosas de menor a mayor de agente deshidratante, por ejemplo, Alcohol Etílico o Acetona.

A fin de que se puedan obtener cortes suficientemente finos para ser observados al microscopio, los tejidos tienen que ser fijados, deshidratados e incluidos y envueltos por una sustancia de consistencia firme. Las sustancias usadas para este fin son: gelatina y parafina. La inclusión se logra al infiltrar la parafina liquida o cualquier medio de inclusión en estado líquido al tejido, que disuelve el medio de aclaramiento y penetra en el tejido. Por lo general se coloca la muestra de tejido en un recipiente y se le agrega la parafina fundida a 60° C, colocando la muestra en una parrilla de 30 minutos a 6 horas manteniendo la temperatura a 60° C.

A manera de introducción describa lo siguiente:

1. ¿Qué es la deshidratación y la inclusión en parafina?
2. ¿Cuál es la finalidad de la deshidratación y la inclusión en parafina en la realización de las técnicas histológicas?

MATERIAL

Para esta practica copie tal cual el material y proponga un objetivo.

Enliste qué reactivos (qué cantidades en gr. o ml) y qué materiales (vasos, probetas, etc.), se emplearon para la realización de esta práctica.

Material técnico

• 2 vasos de precipitados de 500ml
• 1 parrilla eléctrica
• Charola de disección
• 1 Termómetro
• 1 agitador (barrilla de cristal)
• 2 pinzas de disección
• 1 aguja de disección
• 1 molde de plástico (hielera)
• Papel y lápiz
• Envases tetra-pak

Reactivos

• Tren de deshidratación (solución alcohol 70% I, 70% II, 80% I, 80% II, 96% I, 96% II, 100% I, 100% II, Alcohol-Xilol I, Alcohol-Xilol II y el Xilol.)
• Agua destilada
• Parafina con  punto de fusión entre los 50 y 70ºC
• Glicerina

MÉTODOS

Describa la técnica de deshidratación considerando los tiempos que debe realizarse en cada cambio.

Describa la técnica de inclusión en parafina tal y como la realizó en el laboratorio.

RESULTADOS

1) Explique cuál es la función del Xilol en este proceso.

2) Mencione cuál es la función de la parafina en esta técnica histológica.

3) Qué otras substancias se pueden emplear en lugar de parafina para incluir.

4) ¿Por qué razón el tejido que se incluye debe de acomodarse hasta el fondo en la mejor posición?

5) ¿Qué le pasa al bloque de parafina si al incluir el tejido se vierte la parafina en momentos diferentes con temperaturas diferentes?

6) ¿Qué pasa si la parafina empleada para la inclusión no es muy fina o pura?

REPORTE DE LAMINILLAS HISTOLÓGICAS OBSERVADAS

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