Reconocer la presencia de Aminoácidos por la reacción de estos con la Ninhidrina

LABORATORIOS (PRÁCTICA N° 2  Y N°3)

BIOQUÍMICA

PRESENTADO POR:

MARIA BARRERA NORIEGA

DANIELA OROZCO

EMALFY OVIEDO

JUAN PITALUA

ARMILA ALBA ORTIZ

QUÍMICO: JAVIER MARTINEZ GUZMÁN

LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES

Y EDUCACIÓN AMBENTAL

IV SEMESTRE

PLANETA RICA CÓRDOBA

2015

PRÁCTICA N°2

PROPIEDADES FÍSICAS Y QUIMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS

OBJETIVOS:

• Observar algunas propiedades físicas de los Aminoácidos
• Reconocer la presencia de Aminoácidos por la reacción de estos con la Ninhidrina
• Identificar algunosgrupos funcionales presentes en aminoácidos específicos  mediante la formación de productos coloreados.

MARCO TEÓRICO:

Los aminoácidos  contienen grupos funcionales amino y carboxilo. En un α – aminoácido, ambos están unidos al mismo átomo (α)  de carbono. De los aminoácidos presentes  en la naturaleza, sólo 20 de ellos aparecen en las proteínas  de todas las formas de vida,  vegetal, animal o microbiana.  

Los aminoácidos intervienen en la transmisión de impulsos en el sistema nervioso (Glicina y acido glutámico). Los aminoácidos esenciales deben ser suministrados en la alimentación, ya que nuestros cuerpos  no pueden sintetizarlos en cantidades adecuadas para respaldar el crecimiento (niños) o para conservar la salud (adultos).

MATERIALES Y REACTIVOS

        10 Tubos de ensayo

        1 Gradilla

        1 Pinza para tubos de ensayo.

        3 Pipetas de 1, 5 y 10 mls

        1 Gotero.

        1 Estufa

        1 Beaker de 500mls

        Papel indicador.

            Soluciones: al 0.5% de aminoácidos:

Glicina, Tirosina, Triptófano, Fenilalanina, Arginina.

        Ninhidrina: Disolución al 0.2% en alcohol o acetona.

        HNO3 al 10%

        NaOH al 20% o amoniaco.

        Fenol, disolución al 0.1%

        Reactivo de Millón.

        Agua de bromo

        α- Naftol: 0.2%

        Nitrito de sodio.

        Ácido glioxìlico

        Ácido sulfúrico

PROCEDIMIENTO:

1. Examen Físico:

Triptófano: Tenia un olor fuerte, era polvo blanco, (Es como un azúcar granulado) C11 H12 N2 O2

Arginina: Polvo blanco, olor un poco más suave que el Triptófano

C6 H14 N 4 O2

Tirosina:Polvo blanco suave C9 H11 NO3

Glicina: Polvo blanco granulado, olor igual de fuerte como el triptófano

1. Reacción de la Ninhidrina: Agregamos a 0.5ml de solución de aminoácido en tres tubos de ensayo (glicina, tirosina y triptófano)  luego agregar  5 gotas de solución de Ninhidrina,  dejamos  hervir por 3 minutos.

Resultados:

Tubo 1: Glicina + Ninhidrina

Tomó un color violeta, luego que lo calentamos en el baño maría cambio de color, a un morado más fuerte, con una consistencia más pura.

Tubo 2: Tirosina + Ninhidrina

Era de un color amarillo suave, luego que se calentó, tomó un color morado azuloso y de una consistencia más liquida.

Tubo 3: Triptófano + Ninhidrina

Color transparente, luego del baño maría quedo con un color morado suave.

1. Reacción Xantoproteica: Adicionamos  2 gotas de  solución de ácido nítrico a aproximadamente 0.5 ml de solución de aminoácido en cuatro tubos  de ensayo  (glicina, tirosina, Triptófano, y fenilalanina), calentar por 3min,  dejamos  enfriar y observe el cambio de color. Agregamos suficiente NaOH al 20% hasta que la solución sea fuertemente alcalina.

Resultados:

Tubo 1: Glicina + Ácido nítrico

Color transparente, luego del baño, quedo igual no hubo ningún cambio.

Tubo 2: Tirosina + Ácido nítrico

Color transparente, luego del baño maría, tomo un color amarillo suave. Con textura transparente.

Tubo 3: Triptófano + Ácido nítrico

Color Fucsia, luego del baño maría tomo un color anaranjado, mostrándonos que la reacción fue (Positiva +)

Tubo 4: Fenilalanina + Ácido nítrico

Color amarillo transparente, luego del baño maría, el color se tornó amarillo más fuerte.

1. Reacción de Millon: A 0.5 ml de la muestra (Glicina, tirosina, y fenilalanina)  adicionamos  3 gotas del reactivo de millon y caliente en un baño de agua hirviendo por 10 minutos. Deje enfriar  a temperatura  ambiente  agregamos  5 gotas de solución de nitrito de sodio, la aparición de un color rojo ladrillo indica un resultado positivo.

Resultados:

Tubo 1: Glicina + Reactivo de Millon

Color transparente

Tubo 2: Tirosina + Reactivo millon

Color amarillo

Tubo 3: Fenilalanina + reactivo millon

Color transparente.

1. Reacción del Ácido Glioxìlico para el Triptófano: A 1 ml de la muestra (glicina,  tirosina y Triptófano) agregue 1 ml de ácido glioxìlico, Observamos bien  el  color inicial en cada caso.

Resultados

Tubo 1 y tubo 2: (Glicina y Tirosina) al agregarle el ácido Glioxìlico empieza un burbujeo por las paredes del tubo.

Tubo 3: Triptófano + ácido Glioxìlico

Se forma un anillo en la parte inferior del tubo que queda dividido (Agua y aceite). Dando un color purpura (Reacción Positiva +)

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