Aumento de la actividad NADPH oxidasa en cortezas cerebrales de ratones PKU

característica bioquímica más importante de la PKU es crónicamente niveles elevados de fenilalanina en los fluidos y una variedad de tejidos tales como el cerebro. Como ratones Pahenu2-BTBR, creados por químicamente inducida genética mutación en la fenilalanina hidroxilasa, bioquímico y exhiben características neurológicas muy parecidas a los individuos humanos afectados [28], ratones Pahenu2-BTBR son ampliamente utilizados como un ratón ideales modelo para el estudio PKU humano. En el presente trabajo, se encontró que las concentraciones de fenilalanina cerebrocorticales en ratones Pahenu2-BTBR se incrementaron notablemente, llegando a casi 14 veces las de tipo salvaje los ratones de control (Fig. 1A). Estos resultados estaban en buen acuerdo con estudios previos que muestran concentraciones elevadas de fenilalanina en todo el cerebro [29] y la corteza frontal [30] de los ratones en comparación PKU a los niveles de fenilalanina en respectivas estructuras de tipo salvaje controles. Niveles de fenilalanina y superóxido en cortezas cerebrales de tipo ofwild o ratones PKU (n = 6mice / grupo). Una, la medición de las concentraciones de fenilalanina en la de tipo salvaje y ratones PKU utilizando LC-MS / MS. Se observaron un aumento significativo de los niveles de fenilalanina en ratones PKU, en comparación con los ratones de tipo salvaje. B, la detección in situ de niveles de superóxido por DHE oxidado

fluorescencia. La producción de superóxido en cortezas cerebrales de tipo salvaje o ratones PKU se evaluó mediante la detección fluorescente confocal de la conversión de DHE en Et. Arriba, representante

confocal de imágenes de secciones DHE-manchado. En pocas palabras, la comparación de la intensidad de fluorescencia Et entre los grupos. # Pb0.05 y ## Pb0.01 vs el grupo de tipo salvaje, test.WT, de tipo salvaje

3.- Aumento de la actividad NADPH oxidasa en cortezas cerebrales de ratones PKU

El nivel de expresión de la superóxido-producción de NADPH oxidasa en cortezas cerebrales de tipo salvaje y ratones PKU se analizaron tanto en el ARNm y proteínas. Como se muestra en la Fig. 2A, los niveles de mRNA de p47phox y p67phox, las subunidades citosólicas de NADPH oxidasa, se expresaron en niveles ligeramente superiores en los ratones PKU pero no alcanzó estadística importancia en comparación con los ratones de tipo salvaje (PN0.05). Sin embargo, los niveles de proteína de p47phox y p67phox, como se detecto por byWestern detectado análisis, se incrementaron significativamente en los ratones en comparación con PKU controles de tipo salvaje (Fig. 2B). El análisis de la actividad de la NADPH oxidasa mostró que la actividad NADPH oxidasa fue también notablemente elevada en las regiones corticales de ratones PKU (Fig. 3).

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