Bioensayos En Fisiología Vegetal

MÉTODO DE SENESCENCIA DE HOJAS

DE TRIGO

Basado en las investigaciones de S. T. C. Wright.

Descripción del método. Las hojas de trigo separadas de las plantas envejecen y se vuelven amarillas más rápidamente cuando se hacen flotar en agua que en soluciones de citoquininas. El grado de senescencia se determina extrayendo las hojas con etanol y estimando espectroscópicamente el contenido de clorofila, 4 días después de su separación de las plantas.

Aparatos, productos químicos y otros materiales

1. Fórceps.

2. Vermiculita núm. 4.

3. Bandejas de plástico para semillas, de 36 cm de longitud, 23 cm de anchura y 5 cm de profundidad.

4. Local de crecimiento, con un fotoperiodo de 15 horas (500 lumens/pie cuadrado de tubos fluorescentes que den “luz de día”) a 23° C.

5. Incubadora a 25° C.

6. Regla en centímetros.

7. Tijeras.

8. Tabla para cortar.

9. Balanza analítica.

10. Matraces volumétricos, 100 ml.

11. Platos de Petri, de 10 cm de diámetro.

12. Tubos de ensayo Pyrex, de 10 X 1.5 cm.

13. Pipeta, 10 ml.

14. Cestos de alambre para tubos de ensayo, divididos.

15. Termómetro, 0° a 100° C.

16. Recipiente apropiado para baño de agua.

17. Canicas de vidrio.

18. Reloj con segundero.

19. Quemador Bunsen.

20. Tela negra.

21. Espectrofotómetro o colorímetro capaz de medir la absorción de la luz, a una longitud de onda de 665 milimicrones.

22. Etanol al 80%.

23. 250 mg de quinetina para tratamiento estándar.

24. 3 a 100 mg del compuesto que deba evaluarse.

25. Agua destilada.

Material vegetal recomendado.

Plántulas de trigo (Triticum vulgare Vill.) de la variedad Eclipse.

Preparación y selección del material vegetal.

Remójense semillas de trigo en agua destilada, durante 2 horas.

Utilizando fórceps siémbrense las semillas en vermiculita mojada, en las bandejas para simientes, con los embriones orientados hacia arriba y con aproximadamente 1.5 cm entre las semillas y las hileras.

Cúbranse las simientes con una capa delgada de vermiculita y comprímase la superficie con una tabla. Pónganse las bandejas en el local de crecimiento durante 7 días.

Procedimiento.

 Córtense los vástagos (aproximadamente a 11 cm de longitud) con tijeras, cortando inmediatamente por encima del nivel del suelo y alíniense sobre una tabla de corte con las puntas contra una guía de madera. Córtense a 7.5 cm de las puntas.

 Esta porción cortada de las plántulas contiene principalmente la primera hoja; pero en su interior hay porciones de otras hojas.

 Utilícese sólo la primera hoja; retírense y descártense las demás.

 Pésense

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