Celulasle

CELULAS LE O CELULAS DE LUPUS

materiales;

tubos de macro-hematocrito portas

frasquito con 4-8 perlas de vidrio y 1 gota de hepaerina jeringa con aguja gruesa, de 15 cm de largo embudo

Introducción;

El Lupus Eritematoso Sistemico es una enfermedad autoinmune, que afecta a muchos tejidos y organos como articulaciones, piel, sistema nervioso, riñon, corazon, pulmón, sangre, higado, bazo y ojos.

Las células LE son polimorfonucleares que fagocitaron restos nucleares alterado, proveniente de la destrucción del núcleo de otros leucocitos, por el llamado Factor LE (factor nuclear). Este es Ig G- anti ADN que se fija a la superficie del núcleo y determina alteraciones en la cromatina; y entonces al ser recubierto por anticuerpos, es fagocitado por los neutrofilos.

El objetivo es hallar neutrofilos que tengan adherido an su superficie restos nucleares, o bien que los restos esten en su interior.

Existen 2 métodos (entre otros)

A) Método sin coágulo:

1- Sacar sangre al paciente, y colocar en frasquito con las perlas que posean 1 gota de heparina.

2- Dejarlo rotar en el agitador por 30 minutos, o bien agitar vigorosamente por 5 a 10 minutos para generar la lisis de leucocitos.

3- Llevar la muestra a estufa de 37 eC entre 1 a 4 horas, para darle tiempo a los leucocitos enteros a fagocitar los restos de los lisados y que decanten los globulos del plasma.

4- Con la jeringa de aguja larga aspirar la capa de leucocitos, en la interface plasma-globulos rojos y descargar dentro de 2 a 4 tubos de macrohematocrito.

5- Centrifugar a muy baja velocidad (500-1000 rpm), por 5 minutos.

6- Aspirar nuevamente con la jeringa la capa de leucocitosde los tubos, y descargar en los portas, y realizar los extendido con extensor.

7.-Colorear por el método de May Grunwald - Giemsa y ver con objetivo de inmersion.

B) Método con coágulo:

1- Se sacan unos 5 a 10 ml de sangre y se la deja coagular durante2 horas a 37 ºC

.2- Centrifufar a 3500 rpm por 10 minutos

.3- Eliminar el suero y depositar el coagulo sobre varias capas degasa, y éstas sobre un embudo

.4- Aplastar el coagulo con una varilla y recojer el producto en untubo de ensayo.

5- Pasar el liquido obtenido a un tubo de macrohematocrito con la jeringa con aguja larga, y centrifugar 15minutos a 2000 rpm

.6- Usando la misma jeringa, eliminar primero el suero, y luegotomar la capa de leucocitos y depositar en portas para hacerextendidos

.7- Colorear por el metodo de May Grunwald - Giemsa y ver conobjetivo de inmersion.

Observacion e interpretacion:

Buscar los campos bien coloreados y con las celulas bienseparadas, evitando lo observacion de celulas "pegoteadas" por efectode la lisis

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