Comprobación de calibración de micropipeta modelo Accumax P1000

[pic 1]Comprobación de calibración de micropipeta modelo Accumax P1000  

María Helena Sánchez, Leidy Carolina Jaimes, Brenda Valentina Acevedo Remolina*

bvaceve@gmail.com*

Curso Genética Básica y Microbiana, Grupo C, Departamento de Ciencias Básicas, Universidad de Pamplona

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1. Metodología

La práctica de laboratorio consistió en determinar la necesidad de calibración de una micropipeta ACCUMAX P1000 μl a partir de la exactitud y precisión. Por lo cual se llevó a cabo el siguiente procedimiento:

Se inició revisando la parte trasera de la balanza analítica-ADAM Setup pw 54mx 250g d=0,0001g para verificar que su índice de calibración estuviera correcto y tener confiabilidad en los datos.

Seguidamente, se situó en la balanza un vidrio de reloj para pesar los volúmenes de 400 µL y 1000 µL cada uno por triplicado, usando la micropipeta P1000 para tomar estos volúmenes.

Se ajustó el volumen requerido en la micropipeta y se eligió la punta azul, que corresponde a la adecuada según la capacidad de la micropipeta utilizada.

Seguidamente se procedió a tomar el volumen requerido. Donde, primero se oprimió el botón de dosificación hasta el primer tope y se tomó el volumen de agua destilado ya seleccionado, al retirar la micropipeta se soltó el botón dosificador. Para depositar el agua destilada en el vidrio reloj se oprimió el botón dosificador hasta el segundo tope para su correcta expulsión.

Al finalizar cada una de las mediciones se iba registrando cada masa (mg) arrojada por la balanza.

Intermitentemente en cada medición, se limpió y seco el vidrio de reloj y se taro la balanza en cada repetición. Por último, se tomó la temperatura del agua destilada utilizada.  

1.  Resultados y Análisis

A partir de la obtención de las medidas experimentales para volúmenes de 400µl y 1000µl, representados en la siguiente tabla:

Tabla 1. Masa de agua destilada obtenida en cada repetición para los dos volúmenes.

Es necesario la conversión de masa a volumen, propiedades de la materia relacionadas con la conocida propiedad física “densidad”, definida como la proporción de la masa de un objeto a su volumen (Martha Marie, 2002). Expresada mediante la ecuación:[pic 3]

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Teniendo en cuenta que el agua destilada posee una densidad de 1g/ml o 1mg/µl, pues los valores experimentales serán los mismos con unidad de microlitros, ya que esta unidad está más relacionada con la realidad práctica en el área de la genética.

Los cálculos obtenidos a partir de este punto, serán exclusivamente con los datos de 400µl. La media o volumen promedio de los mismos que posteriormente se utilizará es de 398,93µl. Hallada mediante,

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Este dato no tiene en cuenta el factor de correlación de temperatura, el cual afecta el empuje del aire sobre la masa, causando posteriormente un error en el análisis de los datos. De acuerdo a la guía de laboratorio de genética básica y microbiana, el factor de corrección (Z) para 20°C que fue la temperatura del agua destilada equivale a 1,00284µl/mg. Por lo tanto, al ejecutar la siguiente ecuación[pic 8]

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A partir del volumen promedio corregido (X) se logra calcular la inexactitud (%D) para el volumen de 400µl, mediante la ecuación expresada a continuación:[pic 12]

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Finalmente, para conocer el coeficiente de variación (CV%) es imprescindible conocer la desviación estándar corregida, aplicando lo siguiente:[pic 16]

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Conociendo el dato anterior se puede calcular el coeficiente de variación (%CV), tomando los datos obtenidos de la desviación estándar corregida y el volumen promedio, demostrado de manera explícita: [pic 20][pic 21]

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Considerando que el proceso para la obtención de resultados explicado anteriormente es el mismo para los dos volúmenes, 400µl y 1000µl. Los resultados serán expuestos en la siguiente tabla:

Tabla 2. Inexactitud y coeficiente de variación para volumen de 400µl y 1000µl, respectivamente.

El porcentaje de inexactitud para los volúmenes de 400 µl y 1000 µl fue de 0,015% y de 0,096% respectivamente. A su vez, el coeficiente de variación para los volúmenes antes mencionados fue de 0,16% y de 0,26% respectivamente.

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