Cromatografía en columna

Cromatografía en columna

Laboratorio de Q. Orgánica I

04/10/2012

Facultad de Química

HUERTA ZERÓN H. DIEGO

RAMOS VELÁZQUEZ L. DANIEL

OBJETIVOS

• Identificar las características, diferencias y ventajas de la cromatografía en columna en columna respecta a la c.c.f

• Identificar los criterios para seleccionar Un eluyente y una fase móvil en la cromatografía en columna.

• Purificar una sustancia por medio de una cromatografía en columna.

• Utilizar la técnicas de Cromatografía en columna y c.c.f. en al purificación de un sólido.

INTRODUCCIÓN

La cromatografía en columna es la técnica de separación e identificación de sustancias químicas, por la diferente retención que experimentan los componentes de una mezcla, al ser más o menos adsorbidos por los componentes de una fase fija situada en una columna, cuando son arrastrados por un fluido (fase móvil). Si la fase móvil es líquida hablamos de cromatografía líquida y si es gas será cromatografía de gases. El adsorbente, suele ser gel de sílice o alúmina, pero pueden ser otros.

Intervienen los fenómenos de adsorción y disolución, por consiguiente es fundamental tener en cuenta la polaridad, tanto de las sustancias a arrastrar como del disolvente, si queremos tener una buena separación.

El disolvente al descender arrastra las sustancias a distinta velocidad según la mayor o menor retención que experimenten, y salen de la columna a distinto tiempo.

De acuerdo con el mecanismo de separación la técnica de cromatografía puede separarse en:

Cromatografía de adsorción. Diferente afinidad de adsorción de los componentes de la muestra sobre la superficie de un sólido activo. La adsorción es la capacidad de las superficies para fijar moléculas. La fase estacionaria es siempre sólida, por ejemplo: alúmina, gel de sílice, carbón activado, fosfato cálcico e hidroxiapatito.

Cromatografía de reparto. Diferente solubilidad de los compuestos de la muestra en la fase estacionario (en al caso de la cromatografía de gases), o diferentes solubilidades de los componentes de la fase móvil y estacionaria (en el caso de la cromatografía líquida). La fase estacionario es siempre líquida. En c.c.f. la fase estacionaria es el agua o disolvente asociados a la celulosa (papel) o al soporte sólido que forma la capa fina; en columna, como fase estacionario se usan tierras diatomeas, gel de sílice, celulosa en polvo, etcétera.

Existen tres factores que influyen en la separación de una mezcla por el método de cromatografía en columna: polaridad del disolvente, polaridad del producto y la actividad del adsorbente.

Análisis de resultados:

Tomamos una muestra de 200 mg de cafiaspirina, el eluyente arrastró la cafeína mientras que el adsorbente retuvo al ácido acetilsalisílico. La c.c.f reveló la presencia

...