“DETERMINACIÓN DE AMINOÁCIDOS TERMINALES CON UN GRUPO ALFA AMINO LIBRE MÉTODO DE SANGER”

“DETERMINACIÓN DE AMINOÁCIDOS TERMINALES CON UN GRUPO ALFA AMINO LIBRE MÉTODO DE SANGER”

INTRODUCCIÓN:

Los aminoácidos son compuestos orgánicos que se combinan para formar proteínas.

El estudio exacto de los aminoácidos en una proteína era tan complejo que muy pocos científicos llegaban a conocer. Hoy día, conocemos la serie completa de los ácidos aminados en la insulina, diversas enzimas, la hemoglobina y la mioglobina.

El proceso técnico que permitió adquirir estos nuevos conocimientos se debió a Frederick Sanger. Identificó el aminoácido del extremo de las cadenas peptídicas marcando dicho extremo libre con un grupo dinitrofenilo (DNP).La utilidad de esta reacción para el estudio del ácido aminado del extremo N en un polipéptido dependía de la estabilidad del grupo DNP frente a la hidrólisis ácida. Este enlace es estable en la mayor parte de derivados de aminoácidos.

El reactivo utilizado por Sanger para este fin fue el 1-flúor,2,4-dinitrobenceno (FDNB). Éste reactivo de color amarillo reacciona con los grupos amino libres en condiciones alcalinas formando los dinitrofenil derivados. El DNFB además de reaccionar con los grupos alfa-amino libres, reacciona con los grupos imidazol, fenólicos y épsilon-amino, por lo que también se obtendrán los DNP derivados de la histidina, tirosina y lisina.

OBJETIVOS:

• Conocer y utiliza la proteína de hemoglobina para determinación de aminoácidos por el método de sanger.
• Realizar una cromatografía para identificar el alfa-aminoácido de la hemoglobina.
• Conocer las características y propiedades químicas del reactivo de sanger para obtener el aminoácido deseado.

RESULTADOS:[pic 1]

TABLA.1 CÁLCULOS DE RF

[pic 2]

Fórmula:                                                                                

DISCUSIÓN:

CONCLUSIONES:

BIBLIOGRAFÍA:

DR.GEORGE RENDINA., 1974.”TÉCNICAS DE BIOQUÍMICA.APLICADA”.EDITORIAL.INTERAMERICANA.IMPRESO EN MÉXICO, P.74, 75.

...