Eficacia terapéutica de células similares a hepatocitos funcionales derivadas de células madre epiteliales amnióticas humanas en ratones con insuficiencia hepática aguda

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THERAPEUTIC EFFICIENCY OF HUMAN AMNIOTIC EPITHELIAL STEM CELL-DERIVED FUNCTIONAL HEPATOCYTE-LIKE CELLS IN MICE WITH ACUTE HEPATIC FAILURE

Eficacia terapéutica de células similares a hepatocitos funcionales derivadas de células madre epiteliales amnióticas humanas en ratones con insuficiencia hepática aguda

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Herrera Sánchez Arlet

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El trasplante de hígado y el transplante hepatocitos son propuestas que se han dado como un tratamiento eficaz para pacientes con insuficiencia hepática aguda, sin embargo, su aplicación está limitada por una grave escasez de hígados de donantes. Así que las células madre pluripotentes humanas se han convertido en una fuente potencial de células para la medicina regenerativa y células madre epiteliales amnióticas humanas, las cuales son derivadas de la membrana amniótica, tienen un potencial de diferenciación multilinaje, nula tumorigenicidad y bajo perfil de inmunogenecidad, por todo esto son adecuadas para una posible aplicación en la regeneración de hepatocitos y de esa manera tratamiento con insuficiencia hepática aguda.

Métodos

Las características pluripotentes, la inmunogenicidad y la tumorigenicidad de las células madre epiteliales amnióticas humanas se estudiaron mediante diversos métodos y posteriormente estas células madre epiteliales amnióticas humanas se diferenciaron en células similares a hepatocitos utilizando un protocolo de inducción no transgénico y de tres pasos durante 14 días. 

La secreción de albumina, proteína que se encuentra en gran proporción en el plasma sanguíneo, siendo la principal proteína de la sangre, y una de las más abundantes en el ser humano; la producción de urea, p rincipal producto terminal del metabolismo de las proteínas, la tinción periódica con ácido de Schiff y la captación de ICG (El verde de indocianina es un colorante de cianina utilizado en el diagnóstico médico. Se utiliza para determinar el gasto cardíaco, la función hepática y el flujo sanguíneo del hígado, y para la angiografía oftálmica) se realizaron para investigar la función de las células similares a los hepatocitos. Posteriormente las células similares a los hepatocitos se transplantaron en ratones ALF NOD-SCID (diabéticos no obesos con inmunodeficiencia combinada grave).

Los efectos terapéuticos se determinaron mediante pruebas de función hepática, en las que al tercer día y séptimo día después del trasplante de células similares a los hepatocitos, se recogieron muestras de sangre de cada ratón y luego se centrifugaron a 3500 rpm durante 30 min. El suero se recolectó para medir la bilirrubina total, alanina aminotransferasa, aspartato aminotransferasa, albúminal y fosfatasa alcalina con un analizador bioquímico automatizado histopatología y análisis de tasa de supervivencia; la capacidad de las HLCcelulas similares a los hepatocitos para injertar el hígado dañado se evaluó detectando la presencia de células positivas para GFP (proteína verde fluorescente que emite fluorescencia en la zona verde del espectro visible. El gen que codifica esta proteína está aislado y se utiliza habitualmente en biología molecular como marcador)

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