Electroforesis de Ácidos Nucleicos en Geles de Agarosa 1. OBJETIVOS
Enviado por Alejandro Canedo Gonzales • 25 de Mayo de 2018 • Informe • 1.057 Palabras (5 Páginas) • 1.093 Visitas
Electroforesis de Ácidos Nucleicos en Geles de Agarosa
1. OBJETIVOS
Objetivo General:
- Aplicar los conocimientos de electroforesis en geles de agarosa para realizar la separación de los fragmentos de DNA de diferentes muestras al ser sometidas a corriente eléctrica.
Objetivos Específicos:
- Practicar la técnica de sembrado de pocitos con la ayuda de la micro pipeta, para obtener buenos resultados en la práctica de laboratorio.
- Familiarizarse con métodos de separación de ácidos nucleicos mediante la electroforesis en geles de agarosa.
- Observar la migración de los fragmentos de DNA de las muestras, mediante la tinción del gel de agarosa con bromuro de etidio al transluminador de ultravioleta.
- Analizar la separación de los fragmentos de DNA en el gel de agarosa en el que dichos fragmentos migran a diferentes velocidades según el peso molecular.
2. METODOLOGÍA [pic 1]
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3. RESULTDADOS [pic 23]
FIGURA: 1 corrida electroforética a 100 voltios en gel de agarosa[pic 24]
CARRIL | MUESTRA |
1 | No hubo corrida en el carril y pozo brillante. |
2 | Hubo la corrida en el carril y pozo brillante |
3 | No hubo corrida en el carril observado y pozo brillante. |
4 | Hubo la corrida en el carril observando pozo brillante en su separación. |
5 | Hubo corrida en el carril observado y pozo brillante. |
6 | Hubo la corrida en el carril observando pozo brillante en su separación |
7 | Hubo la corrida en el carril observando pozo brillante en su separación |
TABLA: 2 resultados obtenidos de la separación electroforética en gel de agarosa
4. DISCUSIÓN
Se trabajó con DNA cromosomal bacteriano en esta caso vemos en todos los casos brillo en los pozos, lo cual involucra que en el caso del carril 1 y 3 probablemente no existe DNA, pero si hay brillo nos puede indicar que si habría DNA de baja pureza, que puede estar contaminación con proteínas las cuales no dejan que migre por el mayor peso molecular.
En los siguientes casos vemos que puede que exista DNA y RNA, brillan las bandas pero no de buena calidad esto puede ser por la mayor presencia de RNA o el DNA pude que se estuviera degradando es por eso de brillo en los pozos con una baja cantidad hay bandas casi estables pero su concentración de material genético puede ser de menor intensidad.
Electroforesis en gel de agarosa ha demostrado ser una manera eficiente y eficaz de separar los ácidos nucleicos en gel de agarosa, para la separación de fragmentos de ADN.
EtBr es el reactivo más común usado para teñir ADN en geles de agarosa. Cuando se expone a la luz UV, los electrones en el anillo aromático de la molécula de etidio se activan, lo que conduce a la liberación de energía (luz) como el retorno electrones a estado fundamental. EtBr funciona por sí mismo intercalando en la molécula de ADN de una manera dependiente de la concentración. Esto permite una estimación de la cantidad de ADN en cualquier banda de ADN particular, sobre la base de su intensidad. Debido a su carga positiva.
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