Enzimas De Restricción.

Las enzimas de restricción son endonucleasas que reconocen una secuencia entre 4-8 pb en ADNs. El sitio de reconocimiento se llama sitio de restricción, y la enzima rompe un enlace fosfodiéster en la hebra de arriba y otro enlace fosfodiéster en la hebra complementaria. Las enzimas de restricción se encuentran en muchas especies de bacterias. Este sistema es análogo a un sistema inmune, y le permite distinguir a la bacteria entre su DNA y el DNA exógeno. El DNA exógeno está último degradado por la enzima de restricción. El DNA propio no es reconocido por sus enzimas de restricción, puesto que previamente lo ha modificado por metilación a través de la acción de una metiltransferasa (enzima que transfiere grupos metilo desde S-adenosilmetionina a bases específicas).

En el año de 1968 son descubiertas por el microbiólogo Werner Arber, este descubrimiento permitió el desarrollo de la tecnología de ADN recombinante que permite por ejemplo, la producción a gran escala de insulina humana para diabéticos utilizado la bacteria E. Coli. Estas enzimas fueron descubiertas en bacterias, donde son usadas como un mecanismo de defensa contra virus invasores debido a que estas enzimas cortan el DNA foráneo para ser degradado, mientras el DNA propio es metilado para protegerlo contra la actividad de la enzima.

Existen varios tipos de enzimas de restricción

Tipo I: Reconoce secuencias específicas y cortan el ADN en sitios no específicos de 1,000 pb.

Tipo II: Reconoce secuencias palindromicas y cortan dentro de la secuencia

Tipo III: Reconocen secuencias específicas de 5-7 pb y cortan de 24-27pb down stream del sitio.

-Sambrook, J. et al. 1989 Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edition, Cold Spring. Laboratory, Cold Spring Harbor, New York.

-David, L.G. Dibner, M.D. & Battery, J.F. Basic methods in molecular biology. Elsiever Science publishing Co. Ind. NY. 1986.

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