Espectrofotocolorimetría

Resumen: Introducción. La Espectrofotocolorimetría es un método óptico de análisis que mide la cantidad de luz absorbida por una sustancia coloreada. Como cualquier otro método espectroscópico, se basa en la medida de la intensidad y la longitud de onda de la radiación electromagnética que ha atravesado la materia o que ésta emite. Objetivo. Estudiar las leyes de la espectrofotometría y sus leyes de aplicación al análisis cuantitativo y la estandarización de métodos. Metodología. Se tomaron 7 balones aforados de 50 ml a los cuales se les agregó a todos las mismas sustancias, exceptuando la muestra (blanco) que no se le adiciono el patrón ll del catión Fe++. Después se tomó el balón aforado intermedio (numero 3). Se colocó en el espectrofotocolorimetro el balón aforado M (blanco), para calibrar, (en este caso se tomo la longitud de onda desde los valores 400 a 600, teniendo en cuenta que estos iban de 20 en 20. Ej. 400-420-440…hasta 600), y con el blanco se calibraba cada vez que se intercambiaba con el balón aforado 3 para registrar la Transmitancia y absorbancia que este presentaba. Resultados. Conclusiones. Los espectros de absorción, gráficos que relacionan absorbancia con Longitudes de onda, son frecuentemente utilizadas en Bioquímica para la caracterización e identificación de biomoléculas. La aplicación obvia de la ley de Lambert-Beer es el uso del colorímetro para determinar la concentración de una gran variedad de moléculas que absorben luz.

PALABRAS CLAVES: Espectrofotocolorimetría, Radiaciones electromagnéticas, Absorbancia, Transmitancia. Curva de calibración, ley de Lamber-Beer

INTRODUCCION:

La Espectrofotocolorimetría se basa principalmente en la absorción y emisión de luz por parte de las sustancias a analizar, a su vez, esto tiene gran incidencia en la estructura misma de las moléculas y de los átomos, en la forma, la distribución de los electrones y la flexibilidad de la misma. El Espectrofotómetro es un instrumento que mide la absorción de las radiaciones electromagnéticas, cuyo principio está basado en la ley de Beer Lambert que relaciona la intensidad de luz incidente y de luz transmitida cuando es atravesada por una longitud de onda en un medio que absorbe dicho instrumento, consta de una fuente de luz caracterizada por un espectro de emisión continuo en un intervalo amplio de longitudes de onda y de un monocromador que actúa como filtro óptico transmitiendo un haz de luz de longitud de onda fija.

Las radiaciones electromagnéticas se caracterizan por su frecuencia (Vi) o por su longitud de onda (Lambda).

Vi= c/ (λ)i

C= velocidad de la luz

Las radiaciones llevan a ellas una determinada cantidad de energía.

E=hx V

Dónde:

h = constante de Planck ( 6.62 x 10-27 erg - s).

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