Factores que afectan la solubilidad Proteica

Factores que afectan la solubilidad Proteica

Las proteínas son biomoléculas sensibles a las condiciones de trabajo en el laboratorio, están constituidas por cadenas de aminoácidos unidos por un enlace peptídico y en disolución muestran importantes cambios en su solubilidad en función de cuatro factores importantes:

• pH
• fuerza iónica
• propiedades dieléctricas del disolvente
• temperatura

De acuerdo a la tabla 1, en los tubos L1 y H1 a los que se les agregó HCl al 2% se hizo una modificación de pH y lo que se esperaba era que ocurriera el fenómeno de precipitación isoeléctrica ya que la solubilidad de las proteínas es altamente afectada por el pH del sistema, ya que el pH al que una proteína muestra un mínimo de solubilidad es su pH isoeléctrico, En estas condiciones no existe repulsión electrostática entre moléculas vecinas y tienden a coalescer y precipitar; pero cuando los valores de pH están por encima o por debajo de del punto isoeléctrico, todas las proteínas poseen una carga eléctrica del mismo signo, lo que hace que se repelan mutuamente, impidiendo la coalescencia de las moléculas sencillas para para formar agregados insolubles.

Fraccionamiento con disolventes.

La adición de disolventes orgánicos neutros miscibles con el agua como la acetona que en este caso se le adiciono a los tubos L2 y H2, disminuye la solubilidad de la mayor parte de las proteínas en el agua de una manera tal que precipitan de su disolución. La solubilidad de una proteína a un pH y una fuerza iónica determinada está en función de la constante dieléctrica del medio (el disolvente) y dado que la acetona posee una constante dieléctrica menor que la del agua, su adición a una solución acuosa de proteínas incremente la fuerza de atracción entre las cargas opuestas disminuyendo así el grado de ionización de los grupos R de las proteínas, por esta razón las moléculas de la proteína tienden a precipitar como ocurrió en ambos tubos.

Fuerza iónica (salado de proteínas)

En los tubos L3 y H3 en los que se adiciono 1mL de (NH4)2SO4 saturado la cual es una sal neutra y de iones divalentes y que tiene una gran influencia en la solubilidad proteica de acuerdo a su concentración en la disolución. La capacidad de esta sal para influir en la solubilidad proteica está en su fuerza iónica que es una medida tanto de concentración como de como del número de cargas eléctricas existentes en los aniones y cationes aportados por la sal; este efecto de aumento en la solubilidad de la proteína se debe a los cambios en la tendencia a la ionización de los grupos R en las proteínas, es decir que a bajas concentraciones de la sal la solubilidad aumenta (solubilización por salado). Por el contrario a medida que la fuerza iónica aumenta y con ella la concentración de la sal en la disolución, la solubilidad de la proteína comienza a disminuir y a una concentración lo suficientemente elevada una proteína puede ser precipitada de su disolución (insolubilización por salado). Este efecto fue más notorio en el tubo H3 en el cual parecía haber un mayor precipitado.

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