Fotosintesis

Separación de los pigmentos de la hoja de espinaca mediante

cromatografía en capa fina

Introducción

La cromatografía en capa fina (CCF) es una forma de cromatografía de adsorción

sólido-líquido que constituye una técnica importante en Química Orgánica para el análisis

rápido de muestras que en algunos casos puede estar en el rango de los 10-9 g.

Frecuentemente se usa para el seguimiento de la evolución del progreso de una reacción, o

para el control y seguimiento de las separaciones que se producen mediante una

cromatografía en columna preparativa.

Para realizar el análisis de una muestra por CCF se utiliza un adsorbente sólido

como gel de sílice (SiO2. H2O) o alúmina (Al2O3), unido a una placa rectangular de de vidrio o

plástico. El adsorbente sirve de fase estacionaria. La muestra se aplica en disolución con un

capilar de vidrio en un extremo de la placa, pero no sobre el mismo borde. A continuación se

introduce la placa en un tanque cerrado conteniendo un disolvente o mezcla de disolventes

(fase móvil), de manera que la placa quede apoyada sobre el fondo y el punto con la

muestra, por encima del nivel del líquido. El tanque contiene una atmósfera saturada en el

disolvente para lo cual se introduce un trozo de papel de filtro que debe. La fase móvil

asciende por capilaridad, de forma que se produce el mayor o menor avance de los

componentes de de la mezcla, según su polaridad.

Procedimiento

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