Guia Laboratorio Organica “LIPOSOMAS PORTADORES DE FÁRMACOS”

EXPERIENCIA Nº 5: demostrativa

“LIPOSOMAS PORTADORES DE FÁRMACOS”

Objetivo:

• Formar liposomas estables como portadores de drogas, a partir de lecitina y utilizando Ácido acetilsalicílico como ejemplo de un fármaco.

Introducción

        Los liposomas son vesículas microscópicas constituidas por bicapas fosfolipídicas concéntricas con compartimientos acuosos interiores, cohesionados por fuerzas de van der Waals, provistos con capacidad potencial para el transporte de agentes quimioterapéuticos solubles.

        La principal fuente de fosfolípidos es la lecitina, sustancia natural obtenida de los frutos de soya o de la yema de huevo. La composición de la lecitina y sus propiedades físicas varían según la fuente. La lecitina de huevo tiene aproximadamente un 70% de fosfatidilcolina, y un 25% de fosfatidiletanolamina; mientras que la lecitina de soya tiene aproximadamente un 20% de fosfatidilcolina, un 22% de fosfatidiletanolamina, y un 20% de fosfatidilinositol.

        Los liposomas en sí, poseen la capacidad de incorporar solutos tanto en la fase acuosa como en la lipídica durante su formación. De acuerdo a esta propiedad de ellos, en esta experiencia se prepararán liposomas con un fármaco en solución acuosa en su interior.

        Un ejemplo del uso de los liposomas lo constituye la vitamina C. En condiciones de administración normal, ésta se absorbe alrededor de un 20% permaneciendo el resto en el tracto gastrointestinal para atraer agua y relajar los intestinos. En cambio la vitamina C ingerida como liposoma se absorbe en el organismo en un 93%, que se mide en el flujo sanguíneo, aumentando así en forma notable su absorción debido a los liposomas.

Parte Experimental

Formación de Liposomas con un Fármaco.

1. En un vaso de precipitados con 100 ml de agua destilada fría, agregue 1 gramo de Ácido Acetilsalicílico y agite enérgicamente.

1. Calentar 100 mL de agua destilada en un vaso de precipitados de 250 ml hasta que comience la ebullición. Añadir 3 cápsulas de lecitina de soya y mezclar bajo agitación para que la lecitina se disuelva en el agua caliente.

1. Añadir la solución del ácido Acetilsalicílico (frío, anterior) al vaso con la solución de lecitina caliente y mezclar bien con agitación mecánica.

1. Colocar la mezcla en el sonicador y encenderlo con agitación de 2 minutos intermitentes, hasta que la espuma haya desaparecido, luego de 15 a 20 minutos.

1. Cuando haya terminado tendrá una mezcla que es del color y textura parecida a la leche. Habrá cierta sedimentación, pero no debería ser más de 5% de la mezcla, o similar.

1. Al terminar, vierta la solución en un vaso de vidrio que se tapa con parafilm.

1. Luego de alcanzar la temperatura ambiente, guarde los liposomas con Ácido Acetilsalicílico en el refrigerador. Observe tres veces cada 15 minutos el comportamiento de la mezcla fría.

1. Ponga en un tubo de ensayos pequeño, de diámetro ancho, 3 ml de los liposomas formados, y agregue 5 gotas de una solución de FeCl3.

1. Con ayuda de un gotario, ponga una gota de los liposomas con FeCl3 sobre un porta-objetos y observe los liposomas formados en el microscopio.

Cuestionario:

1. ¿Qué es un sonicador y para qué sirve?
2. Diseñe el diagrama de flujo del trabajo experimental a realizar.
3. ¿Cuáles son los mecanismos de transporte existentes en las membranas plasmáticas?
4. ¿Cuál es el tamaño promedio de micelas y liposomas?
5. ¿Cómo se reordenan los fosfolípidos para formar una micela cuando el solvente es apolar?
6. ¿Cómo actúan las micelas, formadas a partir de un detergente o jabón, con la suciedad?

Referencias

1. Gaulin G., “Make a Cell Membrane”, en:

http://cms.qut.edu.au/__data/assets/pdf_file/0010/23779/Make_cell_membrane_teacher_worksheet.pdf 

1. LIPOSOMES, AN INTRODUCTION:

http://www.pharmainfo.net/nandini/blog/introduction-liposomes

1. HOW TO MAKE LIPOSOMAL WITH VITAMINE C:

www.youtube.com/watch?v=1cBp879mfgI‎

1. Block W., A Better Way to Take Progesterone: http://www.life-enhancement.com/magazine/article/988-a-better-way-to-take-progesterone

...