Hesperidina cargada de nanopartículas de oro como un sistema de administración de medicamentos para un exitoso biocompatible

Hesperidina cargada de nanopartículas de oro como un sistema de administración de medicamentos para un exitoso biocompatible, anticancerígeno, antiinflamatorio y fagocitosis Modelo inductor

La hesperidina como sabemos es aplicado para diversas enfermedades como cancer, pero por su baja solubilidad no se puede absorber por completo, como una solución se plantea hesperidina cargada en nanopartículas de oro (Hsp-AuNP).Para la confirmación de síntesis de AuNPs se utilizan diversas técnicas de caracterización como espectroscopía UV-VIS, FTIR, XRD, feSeM, teM y eDX, análisis de potencial Zeta, análisis de tamaño de partícula y ensayos MTT y cristal violeta para ver el efecto citotóxico de Hsp-AuNPs en la línea celular de cáncer de mama humano. Como resultado hay una disminución en la proliferación e inhibición del crecimiento de las células tratadas. También se determinó  la apoptosis por microscopio de fluorescencia. Se estudia la toxicidad de Hsp-AuNP en ratones evaluando los niveles de marcadores de funcionalidad hepática y renal, sin embargo no se encontraron diferencias estadísticas significativas para los indicadores probados. Las Hsp-AuNPs mejoraron la actividad funcional de los macrófagos contra los ratones portadores de células tumorales de ascitis de Ehrlich. La producción de las citocinas proinflamatorias se evaluaron en células de macrófagos derivadas de médula ósea tratadas con Hsp-AuNP. Los resultados demostraron que el tratamiento con Hsp-AuNPs inhibió significativamente la secreción de IL-1 β, IL-6 y TNF.

Materiales y métodos

Materiales y reactivos

HAuCl  · 3H2O,  L-glutatión reducido (GSH), hidróxido de sodio (NaOH), naranja de acridina, ácido ascórbico, bromuro de etidio, suero fetal bovino, tripsina-EDTA, dimetilsulfóxido (DMSO), 3- (4,5-dimetiltiazal-z-il) -2,5-di-fenilterazolio (MTT) y cristal violeta, suero fetal bovino y el lipopolisacárido (LPS). La penicilina y la estreptomicina impidieron la contaminación con microbios (Biosource International, Nivelles, Bélgica).

Líneas celulares.

Se utilizan una línea celular de cáncer de mama triple negativo humano MDA-MB-231,ratones con células tumorales ascitis de Ehrlich, ratones con línea celular epitelial de mama humana normal (HBL-100) por in vitro ensayo de citotoxicidad y se hicieron cultivos de células MDA-MB-231 o HB-100 en matraces de cultivo de tejidos que contiene medio RPMI-1640 suplementado con 10% de FBS, L-glutamina 2 mM y 20 mM (5% de CO 2, 37 ° C). Para examinar la actividad de los macrófagos contra las células tumorales, las células tumorales de ascitis de Ehrlich se mantuvieron en condiciones similares de células normales o de cáncer de mama.

Preparación de nanopartículas de oro.

La nanopartícula de oro fue sintetizada por el método de Wu y su compañero de trabajo. Una solución acuosa de ácido tetracloroaúrico (0.025 M de HAuCl 4) 3H 2 O, 1 ml) se mezcló con una solución acuosa de GSH (0,019 M, 8 ml) y se agitó vigorosamente durante 30 minutos. Luego, se usó NaOH (0.1 M) para llevar el pH de la mezcla a 8. Inmediatamente, el color amarillo desapareció y después de 30 minutos apareció una solución incolora. Una solución recién preparada de NaBH después de 30 minutos apareció una solución incolora. Una solución recién preparada de NaBH 4 (2 mg ml - 1 en agua) se añadió gota a gota bajo agitación vigorosa hasta que la solución cambió a color rojo. Después de eso, la solución se agitó y se dejó durante la noche a temperatura ambiente para una reacción adicional. El exceso de GSH fue eliminado por ultra centrifugación usando un Vivaspin de 20 columnas (13.600 rpm durante 30 min) y tampón de fosfato de sodio a pH 8.0 (10 mM, ~ 10 mL × 20) para eliminar sales y GSH libre. Después de la centrifugación, se retiró el sobrenadante y los GSH-AuNP depositados se disolvieron en 2 ml de agua destilada desionizada.

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