Imunoprecipitacion

La inmunoprecipitación nos permite el aislamiento del antígeno de interés en una célula o tejido determinado, y además se pueden determinar:

Presencia y cantidad de antígeno

Peso molecular relativo de una cadena poli peptídica

Síntesis y degradación

Interacción con proteínas

Ácidos nucleicos u otros ligados.

Un extracto de una rotura de células o tejidos se mezcla con un anticuerpo contra el antígeno a fin de formar un complejo antígeno-anticuerpo que se precipitara.

Por la necesidad de formar un complejo antígeno-anticuerpo la prueba puede requerir horas, incluso días

La base de esta técnica consiste en concentrar al máximo la proteína de interés para posteriormente desarrollar los inmunocomplejos, de tal forma que el número de bandas inespecíficas obtenidas por esta técnica disminuye considerablemente

Las pruebas de inmunoprecipitación son procedimientos serológicos que demuestran la existencia de anticuerpos capaces de provocar la precipitación de sus correspondientes antígenos.

Pueden ser realizadas en medios líquidos como en medios semi-sólidos(geles).

Cuando lo realizamos en medios liquidos damos que la interacción de antígeno y anticuerpo resulta a menudo perturbada por la formación de corrientes y otros disturbios debido a cambios de temperatura o pH, por lo contrario en el gel se forman mallas que estabilizan la solución, facilitando el revelado de la reacción antígeno-anticuerpo.

Para que ocurra la inmunoprecipitacion se necesita de que interactúen una solución de anticuerpos que sean bivalentes, con antígenos multivalentes, cuando ocurre esto es posible que se programen los agregados moleculares que, al entrelazarse, adquirirán la propiedad de precipitar.

Los anticuerpos que son mas usados en la inmunoprecipitacion son los de clase lgG de las inmunoglobulinas, también son usados los igM.

Las pruebas de inmunoprecipitacion tales como la prueba de inmunodifusión, electroinmunodifusión, e inmunoelectroforésis, suelen ser usadas para cuantificar e identificar las inmunoglobulinas u otras proteínas también para las identificación de bacterias etc.

El método de inmunodifusión nos permiten identificar compuestos antigénicos que pueden estar jugando un papel importante en la patogenicidad de una enfermedad.

La inmunodifusión doble se caracteriza porque el antígeno y el anticuerpo se difunden espontáneamente en el gel; de el sitio donde se encuentran en zona de equivalencia forman una línea deprecipitación visible. La interacción de ambos reactantes es consecuencia de la agitación térmica de las moléculas e iones y la velocidad será proporcional a la diferencia de concentraciones que existen entre el pozo y el gel circulante, la cual disminuirá progresivamente a medida que el reactivo se vaya diluyendo al difundir en la agarosa.

En general,

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