Laboratio Adn

INTRODUCCIÓN

Sin duda estamos en el estadío de la segunda revolución más grande de la biología; el descubrimiento de la célula representó ese primer momento, el descubrimiento del ADN representó ese segundo momento, y eso de alguna manera lo estamos viendo en el llamado genoma humano, alimentación transgénica, clonación terapéutica, eventos científicos sociales que está cambiando la Visión del mundo

El presente informe de laboratorio tiene que ver con un procedimiento que nos permite inferir la existencia de esta biomolécula en tal sentido recogemos la experiencia que sobre el tema se ha desarrollado acerca de la extracción del ADN, de tejidos animales y vegetales y reflexionar sobre la simpleza de su composición con sencillas técnicas.

OBJETIVO

 Realizar la extracción de ADN de tejidos animales y vegetales y reflexionar sobre la simpleza de su composición con sencillas técnicas.

Objetivo específicos:

 Aprender y aplicar una técnica sencilla de extracción del ADN de un tejido animal y vegetal.

 Observar y reconocer la estructura fibrilar del ADN.

 Realizar la extracción del ADN presente en las células del hígado de pollo y diferentes vegetales.

MATERIALES

 Trozos de tomate, hígado de pollo, ajo y cebolla

 100 ml de agua destilada

 Un colador pequeño o una tela para filtrar

 Dos tubos de ensayo

 Sal (9 gramos)

 Detergente liquido al 20% (2ml)

 Alcohol

 Bicarbonato de sodio (50gr)

 2 vasos de precipitado de 150 ml y 250 ml

 Un mortero

 Batidora o licuadora

 Gradilla agitador de vidrio

 Hielo

 Ablandador de carne

 Espátula

 Lápiz

PROCEDIMIENTO

1. Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un baño de hielo triturado:

 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.

 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.

 5 g de bicarbonato sódico.

 5 ml de detergente líquido o champú.

2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.

3. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.

4. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.

5. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.

6. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.

NOTA: El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN.

HIPOTESIS

1. ¿El ADN de las células animales es igual al de las células vegetales?

R/ En cuanto a la estructura bioquímica, el ADN vegetal y animal no tienen diferencias. Poseen 2 cadenas de nucleótidos helicoidales con giros hacia la derecha, bases nitrogenadas complementarias (A - T, C - G) iguales.

Donde el ADN de los animales y vegetales tiene la misma composición química teniendo 4 nucleticos.

2. ¿Es posible establecer diferencias entre el ADN de las células animales y de las células vegetales?

R/ Si

 Los compuestos que se encuentran en las células vegetales están ausentes en las células animales.

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