Microscopia Óptica Y Estereoscópica.

OBJETIVOS.

• Aprender a utilizar el microscopio óptico como herramienta necesaria para la observación de células que conforman a los seres vivos.

• Comprender el fundamento de la microscopia óptica y estereoscópica para así poder llevar a cabo un correcto uso de esta técnica en el ámbito biológico, químico y diagnóstico.

INTRODUCCIÓN.

Los primeros grandes avances en la ciencia –y en particular en las ciencias biológicas– se deben en parte a la invención del microscopio óptico, cuando a finales del siglo XVII Anton van Leeuwenhoek, tallando lentes, pudo apreciar el mundo que por su tamaño tan pequeño no era posible ver a simple vista: el mundo microscópico. Sin embargo, los intentos de amplificar imágenes se remontan a los griegos y romanos, quienes emplearon esferas de vidrio llenas de agua, las que solo eran útiles para observar heridas y tejidos, más no ese mundo diminuto. Las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea al observar al microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia. Afortunadamente, años más tarde, gracias a la invención del microscopio óptico, el hombre pudo tener evidencia del gran mundo que existía más allá de las lentes y descubrir así un universo inorgánico, como los cristales de la sal de mesa o las sales de oxalato que se encuentran en la orina y cuya acumulación es la causa de los cálculos renales. Asimismo, pudo observar los lentos desplazamientos de un parásito intestinal, la ameba, lo que también ayudó a que se quitara la venda del oscurantismo y dar así los primeros pasos en la ciencia moderna. Un hecho más, de entre tantos destacables, fue que gracias al microscopio óptico algunos químicos y médicos, como Louis Pasteur y Robert Koch, pudieran estudiar las enfermedades que asediaban a la humanidad. El microscopio óptico consta de tres sistemas: mecánico, de iluminación y óptico. El sistema mecánico se encarga de dar estabilidad y fuerza a este aparato, así como facilitar su manejo. Su función más importante consiste en sostener el sistema óptico y variar la distancia entre las lentes y lo que deseamos observar. La iluminación se encarga, como su nombre lo indica, de iluminar lo que se quiere ver. Finalmente, el sistema óptico aumenta (ópticamente) el tamaño de las imágenes y está integrado por lentes de cristal que desvían la luz al pasar a través de ellas, concentrándola o dispersándola. El microscopio estereoscópico, por su parte, tiene un diseño distinto y su utilidad es diferente, pues se utiliza para ofrecer una imagen estereoscópica (3D) de la muestra. El diseño convergente consiste en usar dos microscopios idénticos inclinados un cierto ángulo uno con respecto a otro y acoplados mecánicamente de tal forma que enfocan la imagen en el mismo punto y con el mismo aumento. Aunque es un diseño económico, potente y en el que las aberraciones resultan muy fáciles de corregir, presenta algunas limitaciones en cuanto a modularidad (capacidad de modificar el sistema para poner accesorios) y la observación durante tiempos largos resulta fatigosa. El microscopio estereoscópico es apropiado para observar objetos de tamaños relativamente grandes, por lo que no es necesario modificar los objetos a ver, (laminar) ni tampoco lo es que la luz pase a través de la muestra. Este tipo de microscopios permite una distancias que van desde un par de centímetros a las decenas de ellos desde la muestra al objetivo. Hay varios tipos de microscopios disponibles en el mercado. Seleccionar un tipo adecuado no es una tarea simple, ya que tienes la necesidad de determinar para qué fin será utilizado exactamente. Algunos tipos de microscopios son: el microscopio óptico, el microscopio compuesto, el microscopio digital, el microscopio fluorescente, el microscopio electrónico, el microscopio estereoscópico, etc, por lo tanto también hay distintos tipos de microscopias: Microscopía óptica normal (de campo brillante coloreado), Microscopía de campo brillante, Microscopía en contraste de fase, microscopía diferencial de contraste de interferencia, Microscopia óptica, Microscopia electrónica, etc. La iluminación Köhler es un prerrequisito para todos los otros métodos de visualización. La función de la iluminación Köhler es iluminar un espécimen con un campo uniforme de luz que sea del mismo diámetro que el área de captura del objetivo. Una imagen del campo diafragma se enfoca por la lente condensadora sobre el plano del espécimen, iluminando de esta manera con un cono sólido de luz homogénea. El ajuste del campo iris limita el diámetro del cono de luz de manera que sólo el campo de visión (y no más) de cualquier lente objetivo dada sea iluminada. Iluminando sólo el campo de visión disminuye la degradación de luz por dispersión.

METODOLOGIA.

La metodología es la indicada en el manual de Anatomía e Histología Humana, página 12,

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