Práctica #5:Extracción de Pigmentos Fotosintéticos

Universidad Nacional Autónoma de México

Colegio de Ciencias y Humanidades Plantel Naucalpan

Biología 1

Grupo: 330 A . Fecha: 21/11/2017

Profesora: Macarita Calcáneo Garcés

Integrantes:

Duran Muro Pablo Ismael

Hernández Pérez Cristina

Luna Castillo Estefanía

Mora Cruz Luis Antonio

Valencia Plaza Kimberley Monserrat

Equipo: 2

Fecha de entrega: 21/11/2017

Práctica #5:Extracción de Pigmentos Fotosintéticos.

Introducción:

Los organismos fotosintéticos atrapan la luz solar formando ATP y NADH, que utilizan como fuente de energía para fabricar glúcidos y otros componentes orgánicos a partir de CO2 + H2O; de forma simultánea libera O2 a la atmósfera. El CO2 formado en la respiración de los heterótrofos regresa a la atmósfera para volver a ser utilizado por los organismos fotosintéticos. La fotosíntesis se lleva a cabo en los cloroplastos, los cloroplastos son organismos fotosintéticos de algunas células eucariotas que contienen clorofila.

Los pigmentos más importantes que absorben luz en las membranas de los tilacoides son las clorofilas, pigmentos verdes que funcionan como receptores de energía luminosa. Los cloroplastos de las plantas superiores contienen siempre dos tipos de clorofila. Una es invariable la clorofila a, mientras que la segunda es en muchas especies la clorofila b, la cual tiene un grupo de aldehído en lugar de un grupo metilo unido al anillo II. Aunque las dos son verdes sus espectros de absorción son ligeramente diferentes. La mayoría de las plantas superiores contienen aproximadamente el doble de clorofila a que la clorofila b.

Las membranas tilacoides contienen pigmentos secundarios que también absorben luz llamados conjuntamente pigmentos accesorios, los carotenoides y las ficobilinas. Los carotenoides pueden ser amarillos, rojos o púrpura. Las ficobilinas pueden ser rojas, azules o marrones.

Las cantidades relativos de clorofila y pigmentos accesorios son características de las diferentes especies vegetales. La variación de las proporciones de estos pigmentos es la responsable de la gama de colores de los organismos fotosintéticos.

Objetivo:

Que el alumno identifique los diferentes pigmentos que intervienen en el proceso de fotosíntesis en la planta de espinaca.

Material:

Dos hojas de papel filtro

Una parrilla eléctrica

Un embudo de decantación (separación)

Cuatro tubos de ensaye grandes

Un vaso de precipitado de 100 ml.

Dos probetas graduadas de 10 ml.

Un matraz Earlen Mayer de 200 ml.

Una gradilla

Un embudo

Un agitador

Unas tijeras

2 pinzas de plástico para ropa

Una barra de plastilina

Substancias

Alcohol etílico

Alcohol metílico

Éter de petróleo

Solución concentrada de hidróxido de potasio

Organismos:

Hojas de espinaca

Procedimiento:

Revisar que el lugar de trabajo y todo el material de cristalería estén limpios

En el matraz se colocan las hojas de espinaca en trozos.

Añadir 50 ml. de alcohol etílico y calentar suavemente (sin que llegue a hervir).

Esperar a que las hojas tomen color blanco.

Pasar la solución al vaso de precipitado por filtración.

En un tubo de ensaye colocar 10 ml. de éter de petróleo y agregar 5 ml. de la solución

filtrada anteriormente y agitar.

Tomar 5 ml. de esta nueva solución y ponerla en otro tubo de ensaye y añadir 2.5 ml. de

solución concentrada de hidróxido de potasio.

Añadir de uno en uno 7 ml. de agua agitando fuertemente en cada ocasión y dejar

reposar durante 15 minutos.

Aparecerán dos capas, la primera con carotenos y

xantofilas y la otra con clorofilas.

Colocar la solución en el embudo de decantación y separar la capa inferior en un tubo

de ensaye.

Añadir 10 ml. de éter de petróleo y 10 ml. de alcohol metílico, agitar fuertemente y

dejar reposar. Aparecerán dos capas la superior de xantofilas y la inferior de carotenos.

La solución que quedo en el embudo de decantación se mide con la probeta y se pasa a un tubo de ensaye, se le añade una cantidad similar de alcohol etílico y se deja reposar durante 5 minutos, aparecerán dos capas la superior de clorofila a y la inferior de clorofila b.

Cromatografia:

Se corta una tira de papel filtro de 3 cm. de ancho por 10 de largo y se introduce uno de los extremos en el vaso de precipitado que contiene la solución filtrada

La tira de papel filtro se sostiene con las dos pinzas para ropa, procurando que no toque el fondo del vaso ni las paredes

Se deja reposar entre 30 y 50 minutos dentro del vaso, hasta que los diferentes pigmentos se distingan en el papel, se retira y se deja secar.

Identificación de los pigmentos de la espinaca

Clorofila a – color verde fuerte o verde azulado

Clorofila b – color verde amarillento

Carotenos – color anaranjado

Xantofilas – color amarillo

Resultados:

Dentro del matraz se colocan espinacas en trozos y 50 ml de alcohol etílico. En la foto se observa el matraz después de haberse calentando en una parrilla eléctrica junto con su contenido, sin que llegue a hervir.

Se observa antes de realizar la práctica el embudo con el papel filtro, en el inferior se encuentra un vaso de precipitado de 100ml.

También se observan 4 tubos de precipitado numerados del 1 al 4 (de izquierda a derecha) antes de realizar la práctica.

Se observan tubos de ensayo graduados del 1-4 (de izquierda a derecha). En el tubo de ensayo número 1 contiene 5 ml del líquido filtrado del matraz (el matraz contenía trozos de espinacas junto con 50ml de alcohol etílico que se puso a calentar en una parrilla electrica sin dejar hervir) más 10 ml de éter de petróleo que después se agitó. El tubo de ensayo número 2 donde se vierte y se agita fuertemente 5ml del tubo de ensayo número 1; 2.5ml de solución concentrada

...