Practica De Glucosa

Universidad de Sonora

Lic. En odontología

Laboratorio de Bioquimica

Practica 2

INTRODUCCION:

La glucosa es el carbohidrato de mayor importancia fisiológica y biomédico. Este hidrato de carbono es rápidamente asimilado en el intestino y transportado hacia los tejidos, principalmente el hígado, a través del torrente sanguíneo. A partir de la glucosa se pueden formar los demás carbohidratos. La glucosa como cualquier carbohidrato es la fuente de energía rápida o de fácil asimilación y/o utilización como fuente de energía. La diabetes mellitus es la principal patología donde el desorden en los niveles de glucosa es su característica principal.

Entre los métodos enzimáticos más usados para cuantificar glucosa en suero y plasma se encuentra el método de la glucosa-oxidasa, que se caracteriza por su elevada especificidad. En este método, la glucosa es oxidada por la enzima glucosa oxidasa, generando ácido glucónico y peróxido de hidrogeno. El peróxido de hidrogeno formado reacciona con un aceptor de oxigeno (como el 2,4-diclorofenol, 4-aminofenazona, 4-aminopiridina, ortodianisadina) para formar un indicador colorido. Cuando se usa como aceptor de oxígeno a la 4-aminofenazona, se produce un color rojo-violeta.

Este método no es afectado por la presencia de ácido úrico, ácido ascórbico, glutatión, anticoagulantes, bilirrubina o creatinina a concentraciones fisiológicas, por lo que puede ser utilizado en todas las aplicaciones clínicas en las que se desee estimar la concentración de glucosa sérica y/o plasmática.

FUNDAMENTO

OBJETIVO

Los estudiantes del curso de Bioquímica II aprenderán a cuantificar, mediante un método colorimétrico, la concentración de glucosa de una muestra problema (suero) utilizando el método colorimétrico enzimático para glucosa sérica de RANDOX.

MUESTRA:

Suero, plasma heparinizado, o plasma-EDTA.

EQUIPO Y MATERIALES

• Colorímetro

• Celdas de plástico de 1 cm

• Micropipetas de 0.01 a 100 ul, de 100 a 1000 ul y puntas

• Un vaso de precipitados de 250 mL

• Pipeta serológica de 1 mL

• 4 tubos de 13 x 100

• Gradilla para tubos

• Mezclador (Vórtex)

REACTIVOS Y MUESTRAS PROBLEMAS

1.-Reactivo Glucosa Oxidasa: Glucosa oxidasa --¿? 1.5 kU/L, peroxidasa ¡? 1.5 kU/L y 4-aminofenazona, en amortiguador de fosfato 0.1 M/L, pH 7 y fenol 11 Mm/L. Contiene también azida de sodio 0.02%

2.- solución patrón de glucosa: 100mg/100mL ( 5.55 Mm/L ).

3.- suero o plasma problema.

METODO

1.- Etiquetamos un tubo de ensaye con el nombre “problema” y otro con “patrón”.

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