Ruvoflavina.

FUNDAMENTOS:

Cuando una molécula absorbe energía electromagnética en general esta energía se pierde en forma de calor cuando se desactiva la molécula por procesos de colisión, Con ciertas moléculas en especial cuando absorben radiación de alta energía, como radiación UV, sólo se pierde parte de la energía en los choques, y entonces el electrón regresa al estado fundamental, emitiendo un fotón de menor energía que la que absorbió. Este proceso de emisión es la fluorescencia. En general, la emisión de fluorescencia sucede con mucha rapidez después de la excitación. La fluorescencia puede ser de dos tipos: fluorescencia natural (autofluorescencia) y fluorescencia secundaria, provocada por los contrastes fluorescentes llamados fluorocromos.

Sustancias con autofluorescencia son la riboflavina (fuertemente fluorescente en disolución acuosa), vitamina A, tiamina. La vitamina B2, también conocida como riboflavina, es un compuesto hidrosoluble, esto quiere decir que puede ser disuelta en agua.  Su color característico es el amarillo, de ahí que a la vitamina b2 se la llame también riboflavina, que en latín quiere decir amarillo. El cuerpo la absorbe muy fácilmente, y las pequeñas partes de ella que quedan en el organismo se retienen en el hígado y en los riñones.

DATOS EXPERIMENTALES

Tabla 1. Resultados de la curva de calibración de riboflavina en diferentes medios.

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Gráfica 1. Curva de calibración 1 de Riboflavina en diferentes medios

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Gráfica 2. Curva de calibración 2 de riboflavina en diferentes medios.

PREGUNTAS

1. ¿Por qué se deben conocer las longitudes de onda de máxima excitación y de máxima emisión? La radiación emitida es la que se mide y se relaciona con la concentración. Las longitudes de onda de la radiación emitida son independientes de la longitud de onda de excitación. Sin embargo, las intensidades, si dependen de ella. Y así de esta forma podemos cuantificar al compuesto

1. Diga cuáles son las formas coenzimáticas de la riboflavina y cuál es su papel en el metabolismo celular.
   Flavina adenina dinucleotido (FAD) y flavina mononucleotido (FMN). Estos compuestos coenzimáticos realizan funciones de trasporte electrónico a través de procesos de óxido-reducción, como puede ser la trasferencia de dos electrones, de manera que tanto el FMN como el FAD aceptan dos átomos de hidrógeno y participan en la producción de energía en la cadena respiratoria y síntesis de ácidos grasos.

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1. Cuáles son las formas resonantes a diferente pH de la riboflavina.

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1. 3 diferencias entre la fluorescencia y fosforescencia.

1. La fosforescencia dura más que la fluorescencia, y puede continuar después de que se apaga la fuente de excitación.
2. Debido a su duración relativamente larga de la fosforescencia, los procesos sin radiación pueden competir más efectivamente con ésta, que con la fluorescencia
3. No se observa fosforescencia en soluciones debido a las colisiones con moléculas de disolvente o de oxígeno. Las mediciones de fosforescencia se hacen enfriando las muestras a temperatura de nitrógeno líquido (-106°C) para congelarlas y reducir al mínimo los choques con otras moléculas.

DISCUSIÓN.

Observamos en las gráficas 1 y 2, que a pH de 1 y 13 la intensidad se va reduciendo, esto se debe porque hay menor resonancia, y en el pH de 13 estamos en un medio alcalino, en el cual la vitamina es inestable y con el HCl  la emisión fluorescente (longitud de onda de máxima emisión y su intensidad) se ve influido por el halógeno que se sustituye en su anillo y así se observa una disminución de la fluorescencia al aumentar el peso atómico Al momento de hacer las soluciones en los diferentes medios observamos que a mayor concentración la fluorescencia se reduce, ya que cuanto mayor sea la absorción, la intensidad de la absorción es mayor. La riboflavina es muy estable frente a calor en medio ácido, razonablemente estable en medio neutro y muy inestable en medio alcalino. Al momento de leer en el fluorómetro tenemos que conservar nuestras cubetas en la oscuridad ya que la riboflavina es muy sensible a la acción de la luz solar, y también, aunque algo menos, de la luz procedente de tubos fluorescentes. La luz de lámparas incandescentes la afecta relativamente poco. Cuando se ilumina la ribloflavina con luz de longitud de onda relativamente corta, en la zona violeta del espectro visible y en el ultravioleta próximo, se producen varios tipos de reacciones. La intensidad varia también al cambio de temperatura, la presencia de oxígeno en el medio, la falta de rigidez de la molécula, a la fluorescencia natural o secundaria.

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