Siembra En Superficie Y Siembra Incorporada

OBJETIVO

Conocer la cantidad de bacterias en una placa con los nutrientes necesarios para sobrevivir y que tipo de bacterias son por medio de la siembra incorporada y la siembra en superficie.

INTRODUCCION

Las bacterias aerobias forman parte de un tipo de organismo que necesita de un ambiente que contenga oxígeno diatónico (un gas compuesto por dos átomos de oxígeno) para poder existir y desarrollarse adecuadamente, es decir, éstas bacterias necesitan oxígeno para la respiración celular.

FUNDAMENTO

Aerobios Obligados: Estos requieren oxígeno para la respiración celular aerobia. Utilizan el oxígeno para oxidar sustratos (tales como grasas y azúcares) para obtener energía.

Anaerobios Facultativos: Pueden emplear oxígeno pero también tienen la capacidad de producir energía por medios anaeróbicos.

MATERIAL REACTIVOS

- Probeta de 100 ml

- 4 cajas Petri

- 1 matraz Erlenmeyer 150 ml

- Soporte universal

- Anillo

- Tela de asbesto

- Mechero

- Agitador

- 1 vaso de precipitados 100 ml

- Rastrillo - Agar sangre

- H2o

- Sangre de un compañero.

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PROCEDIMIENTO

SIEMBRA EN SUPERFICIE

1.- Esterilizar mesas, material y medio de cultivo.

2.- Preparar y diluir muestras.

3.- Etiquetar las placas.

4.- Depositar de 0.1 ml o 100 ml de cada solución.

5.- Duplicar.

6.- Extender las cajas sobre la superficie.

7.- Etiquetar.

8.- Incubar.

9.- Contar colonias.

10.- Lavar material y entregar.

SIEMBRA INCORPORADA

1.-Distribuir las cajas estériles en la mesa de trabajo, (de manera que la inoculación; la adición de medio de cultivo y homogenización, se puedan realizar cómoda y libremente).

2.-Marcar las cajas en sus tapas con los datos pertinentes previamente a su inoculación y correr por duplicado.

3.-Después de inocular las diluciones de las muestras preparadas según la NOM-110-SSA1-1994.

4.-Preparar y diluir diluciones primarias y adicionales.

5.-En las cajas Petri, agregar de 12 a 15 ml del medio preparado.

6.-Mezclarlo mediante 6 movimientos de derecha a izquierda, 6 en el sentido de las manecillas del reloj, 6 en sentido contrario y 6 de atrás a adelante, (cuidar que el medio no moje la cubierta de las cajas).

7.-Dejar solidificar.

8.-Incluir una caja sin inoculo por cada lote de medio y diluyente preparado como testigo de esterilidad.

9.-Incubar las cajas en posición invertida (la tapa hacia abajo) por el tiempo y la temperatura que se requieran según el tipo de alimento

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