Singanini

Introducción:

Espero este pequeño proyecto les sirva para cualquier trabajo aun k no es proyecto muy extenso tratamos de que sea un útil para algún trabajo o ya sea tarea, los temas vistos aquí son muy útiles aun que indagamos muy poco de ellos son datos muy útiles y palabras claves que desenlazan un sinfín de ideas acerca de ello.

Índice:

Técnicas de coloración:

 Giemsa

 Gram

 Azul de metileno

Técnicas de preparación de muestras

 Frotis

 Squash

 Preparaciones temporales y permanentes

Técnicas de determinación

 Glucosa

 Proteínas

 Hp

 Biometría hemática

 Tipos sanguíneos

Técnicas de coloración:

1) Se utiliza la técnica de gota pendiente o entre porta y cubre para observar las distintas estructuras de las bacterias. Verdadero-Falso. Justifique.

FALSO: para ello se utilizan coloraciones compuestas especiales. Las técnicas mencionadas son técnicas de observación en fresco, donde el m.o. vivo no se colorea, o se lo colorea muy suavemente con un colorante vital. Con este tipo de técnica podemos observar:

• Movilidad microbiana

• Morfología general

• Agrupaciones

• Densidad microbiana

• Microorganismos difíciles de colorear

2) El aumento máximo de un microscopio óptico con ocular de 10X y un objetivo de 45X, es de....

450X

3) Un microscopio electrónico tiene un poder de resolución de...

M.E. Transmisión: R = 0,2 nm (0,0002 um) (200 veces la del Microscopio optico)

M.E. Barrido: R = 0,5 nm (0,0005 um)

4) ¿Qué es una coloración vital y para qué se utiliza?

Son coloraciones que se utilizan para preparados en fresco, es decir, sobre microorganismos que serán observados vivos. Los colorantes utilizados no matan al m.o. ya que se concentra en el soma de los mismos sin afectar la viabilidad. Ejemplo de colorantes vitales:

• Azul de metileno

• Verde Jano

• Azul brillante cresil

• Rojo neutro

• Azul de nilo

5) ¿Qué es un mordiente, en qué técnicas se incluye, que variantes conoce?

Es una sustancia que se utiliza en una coloración para hacer más sólida la unión entre el colorante y el sustrato a teñir. Ejemplos:

• Tinción de Gram: IODO

• Coloración de flagelos y pared celular: ácido tánico

6) ¿Qué coloraciones conoce? Clasifíquelas según distintos criterios. ¿Cuáles son las más importantes?

• Vitales

• Simples: azul de metileno, fucsina básica, violeta de genciana.

• Compuestas

o Especiales: Wirtz, Anthony, Leifson, Giemsa, Feulgen, Macchiavello, Castañeda, Gram

o Diferenciales: Gram, Acido-Alcohol-Resistente (Ziehl Neelsen)

Coloraciones especiales:

• Esporas: Técnica de Wirtz (Verde de Malaquita, lavado con Safranina)

• Cápsulas: Técnica de Anthony (sin fijar, Cristal Violeta, lavado con sulfato de cobre)

• Flagelos: Técnica de Leifson (Fucsina básica, ac. tánico)

• Membrana plasmática: Giemsa, Solución iodo-iodurada, etc.

• Pared celular: Ac. tánico, azul Victoria.

• Núcleo: Feulgen

• RICKETTSIAS: Gram (son negativas), Giemsa, Macchiavello, Castañeda

• MICOPLASMAS: Gram (son negativas), Giemsa, Romanowsky

7) ¿Cuál es el fundamento de la coloración de Gram?

Se fundamenta en que, luego de ser teñidas con Cristal Violeta, al lavar con alcohol hay un tipo de bacterias que decoloran y otras que se mantienen coloreadas. Las que mantienen el cristal violeta en su interior se observarán de color violeta, y las otras se observarán rosadas gracias a un coloreado de contraste con Safranina.

8) ¿Cuáles son las teorías que tratan de explicar la coloración de Gram?

• Teoría química: cristal violeta + iodo + proteínas bacterianas = Proteína-iodo-Pararosaanilina

• Teoría del Ribonucleato de Magnesio: proteína propia de las bacterias Gram(+)

• Punto isoeléctrico: cristal violeta = pH 7. Mayor afinidad a Gram(+) que tienen pH mas bajo.

• Permeabilidad: las Gram(-) poseen más lípidos en sus parades que son solubilizados por el alcohol, permitiendo que escape el colorante en el lavado.

9) ¿Cuál es el fundamento de la coloración de Z. Neelsen?

Algunas bacterias son difíciles de colorear, pero una vez coloreadas son resisten¡tes a la decoloración por alcohol-ácido.

Estas bacterias poseen en su pared celular Acido Micólico. El colorante (fenol) es más soluble en éstos lípidos que en el decolorante.

10) ¿Cuáles son los datos que obtiene con cada una de las coloraciones aprendidas?

• Vitales*:

o Entre porta y cubre: movilidad, morfología, agrupaciones, densidad

o Gota colgante: movilidad

• Simples: morfología y agrupaciones

• Compuestas especiales: estructuras específicas

• Compuestas diferenciales: diferenciación de tipo de microorganismo

* Se mencionan las técnicas de observación en fresco con el agregado de un colorante vital.

11) ¿En qué casos se usan las coloraciones simples?

Cuándo sólo se desea observar morfología y agrupaciones.

12) Utilizando un buen microscopio óptico compuesto, con un poder de resolución de 0,3 um, un ocular de 10X y un objetivo de inmersión de aceite de 100X, discerniría objetos separados por qué distancia?

13) ¿Qué técnicas permiten colorear Rickettsias y Clamidias?

• RICKETTSIAS: Gram (son negativas), Giemsa, Macchiavello, Castañeda

• CLAMIDIAS: Giemsa, Macchiavello, Castañeda

14) Para visualizar Micoplasmas, utilizo....

• MICOPLASMAS: Gram (son negativas), Giemsa, Romanowsky

15) ¿Qué coloraciones se utilizan para observar mohos y levaduras? ¿Por qué las técnicas de observación de hongos no deben fijarse?

Coloraciones para mohos y levaduras:

• Azul de lactofenol

• Azul de algodón

• Azul de metileno alcalino

No deben fijarse porque las células fúngicas tienen un gran volumen, y con la fijación la forma se distorsionaría.16) ¿Con qué técnicas de microscopía electrónica visualiza los virus? ¿Qué características se aprecia en cada una de ellas?

17) ¿Cuál

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