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EXPERIMENTO No1: ENZIMA CATALASA

1a.-Funcionamiento de la enzima catalasa en varios organismos: La catalasa se encuentra en los Peroxisomas de las células eucariotas

M A T E R I A L E S

Por laboratorio:

• Peróxido de hidrógeno • Papa • Hígado

• Tomates • Espinaca • Gasa

• Placas de porcelana • Goteros • Morteros o licuadora

P R O C E D I M I E N T O

En este ejercicio se prepararán varios homogenizados para obtener partículas pequeñas y uniformes al mezclarlas con el agua.

1.-Para preparar los homogenizados, corte en pedazos por separado las muestras

2. Usando una licuadora o mortero, muela el material con un poco de agua hasta diluir parte de la muestra; no muela excesivamente para que no queden pedazos muy pequeños del material.

3. De ser necesario, filtre el macerado con una gasa.

4. Coloque 2ml de cada homogenizados en un tubo de ensayo previamente rotulado.

5. Usando un gotero, coloque ocho gotas de cada homogenizado en cada tubo de ensayo

y añada tres gotas de peróxido de hidrógeno, anote sus resultados

a.-. ¿Qué ocurrió al añadir el peróxido?

b.-. ¿Ocurrió lo mismo en todas las muestras?

c.- ¿Por qué se forman burbujas?

d.-¿Por qué se prepararon los homogenizados? ¿Por qué no se añadió el peróxido directamente a los tejidos sin macerarlos?

1-b.-Comportamiento de la catalasa: ¿es igual en todas las muestras?

1. Rotule cinco tubos de ensayo con las letras de A hasta la E

2. Ponga 3 mL de cada homogenizado en los tubos como sigue:

A – Hígado B – Papa C – Tomates D – Espinaca E - Agua

3. Marque el nivel hasta donde llega cada homogenizado.

4. Ponga 3 mL de peróxido de hidrógeno en cada tubo de ensayo.

5. Observe la reacción que sucede en cada tubo y marque el cambio en el nivel del líquido.

6. Tabule los resultados en la Tabla

En el Informe analice

a.-. ¿Fue igual la producción de catalasa en todas las muestras? Y porque?

b.- ¿Qué indican los resultados sobre la fisiología de estos organismos?

Experimento No2: Núcleos de células y organelas

Objetivo general

Conocer los organelas (como el núcleo) y las mitocondrias presentes en diferentes células, identificando las diferentes morfológicas y fisiológicas entre tejidos animales y vegetales. En este caso se tomara las células sanguíneas, las células epiteliales de la boca y de los vegetales.

Material y Método:

Ají amarillo (Xantofila) Zanahoria (caroteno) Beterraga (Antocianina)

Papa (amiloplastos) Harina de arroz (amiloplastos y leucoplastos)

Células de epitelio bucal

Microscopio hojas de afeitar Pinzas en punta

Solución Verde de Janus 1/100001 Frasco con Lugol Solución fisiológica Goteros

PROCEDIMIENTO. Observación de mitocondrias en células de epitelio bucal

1.- Raspe suavemente con una laminilla la mucosa bucal de un integrante del grupo

2.- Realizar un frotis en un portaobjeto limpio

3.- Con el mechero fijar la muestra por calor

4.- Cubrir la muestra con el colorante verde de Janus por 5 minutos

5.- sumergir la lámina en un vaso con agua, dejar secar

6.- Observar al microscopio con objetivos de 40 y 100X

PROCEDIMIENTO. Observación de células sanguíneas

1.- El profesor le dará láminas con frotis sanguíneos coloreados con Wright

2.-Observar con aceite de inmersión y con el objetivo de 100x identificar las diferentes células sanguíneas: eritrocitos, leucocitos y plaquetas, dibujar cada una de ellas

PROCEDIMIENTO. Observación de plastidos en vegetales

1.-Para observar cloroplastos poner una gota de agua con una hoja joven de elodea

2.-Para cromoplastos: realizar cortes finos de zanahoria, ají amarillo, Beterraga y poner con una gota de agua en un portaobjeto poner una laminilla

3.- En una lámina poner una gota de Lugol, agregar una pequeña porción de harina de maíz y en otro extremo un trozo delgado de papa, cubrir con laminilla

4.- Observar todas las muestras con objetivo de 40x

Cuestionario

1. ¿Cuál es la conveniencia de realizar preparaciones en fresco y coloreadas?

2. ¿Cómo se elaboran las preparaciones fijas o permanentes y que beneficio se obtiene de estas?

3. ¿Qué células poseen núcleo y que otras no, cuales son fragmentos de célula para que sirven?

4.-¿ Por qué los núcleos son diferentes en las células sanguíneas y que son las granulaciones presentes en el citoplasma?

5.- Qué significado tienen los cloroplastos, xantofila, carotenos, antocianina, amiloplastos y leucoplastos.

6.-Cuál es el significado evolutivo de la mitocondria

EXPERIMENTO No3.- Acción del cianuro de potasio en la cadena transportadora de electrones

OBJETIVO: Describir las acciones del Cianuro de potasio en la cadena transportadora de electrones en la mitocondria de la paloma y la reversión de los efectos por un antídoto: el nitrito de sodio

MATERIALES

Material Biológico: 01 Palomas de 400 a 500 gr. / por cada sub-grupo en una jaula

Reactivos de laboratorio: Cianuro de Potasio (KCN) Sol. 1 mg/mL.

Nitrito de Sodio (NaNO2) Sol. 20 mg/mil.

Otros: 02 jeringa de 1 mL (tuberculina)

Guantes, mandilón, gorros, mascarillas por cada alumno (obligatorio)

1. PROCEDIMIENTO

1.- Pesar la paloma en gramos

2.- Calcular la dosis a administrarle:

Administración del Fármaco ml: peso paloma en kg x dosis mg/kg

Concentración de las sustancia mg/ml

3.-Tomar datos básales: capacidad de volar, caminar, tipo de respiración y posición del cuello

4.- Administrar Cianuro de Potasio 4 mg/Kg. Por Vía I.M. profunda en el músculo pectoral.

5.- Observar síntomas tóxicos: aleteo, ataxia, cambios de respiratorios, posición del cuello, pueden producirse convulsiones, vómitos y anotarlos

6.-Producidos algunos de estos signos, administrar inmediatamente Sol. de Nitrito de Sodio 40mg/Kg. Por Vía endovenosa rápida, utilizando la vena marginal del ala.

7.-Observar la recuperación.

8.- presente sus resultados, discuta y concluya.

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