Vectores Genética

Quiz vectores

1. ¿Qué es un vector? Es una molécula de ADN de doble cadena, que tiene capacidad de hospedar un fragmento de ADN de origen extraño y se utiliza para transportar una secuencia de ADN a una célula huésped deseada, replicándose independientemente del ADN nuclear.
2. ¿Qué tipos de vectores hay? vectores de clonación y vectores de expresión (bacteriófagos, plásmidos, YAC, BAC, fagémidos, cósmidos).
3. ¿Qué características tiene un vector de clonación? Las características de un vector de clonación son:

• Poseen origen de replicación (sitio de reconocimiento),
• Poseen Marcadores de selección (confiere al vector resistencia a antibióticos),
• Poseen un sitio de clonación (los sitios únicos de reconocimiento de enzimas de restricción, secuencias Diana).
• Un gen identificador o complementación para la identificación de las células que tengan el vector.

1. ¿Qué características debe de tener un vector de expresión?

• Origen de replicación.
• Marcador de selección.
• Sitio múltiple de clonación.
• secuencia que corresponde al promotor (Promotor fuerte).
• Secuencias reguladoras.
• Sitio de unión al ribosoma.

1. Explica el proceso de transformación bacteriana

El proceso de transformación bacteriana es introducir un ADN extraño en las células bacterianas, para luego ser parte del material genético de la bacteria y ser replicado por las nuevas bacterias.

1. Se selecciona el gen de interés a clonar y una bacteria natural competente o puede generarse a través de electroporación, choque térmico o tratamientos a base de CaCl2 para alterar la permeabilidad de la pared celular, de esta manera se permite la entrada de del ADN extraño a través de la membrana celular.
2. Posteriormente se pasa al plaqueamiento y selección de bacterias.

1. ¿Para qué sirve una PCR? es una técnica que se utiliza para "amplificar" pequeños segmentos de ADN y producir enormes cantidades de copias de estos segmentos.
2. Explica que debes hacer si requieres clonar el amplicón (producto de la PCR) con sitios EcoR1 a un vector

Para llevar a cabo la clonación de un amplicón necesitamos emplear una enzima de restricción lo que nos permitiría cortar el ADN del vector e introducir el material genético.

1. ¿Qué es un bacteriófago? Son los virus que infectan bacterias.
2. ¿Qué es un sitio múltiple de clonación en un vector? Son sitios únicos de reconocimiento de enzimas de restricción donde se pueden llevar a cabo los cortes e insertar fragmentos de ADN.
3.  ¿Qué es un gen marcador de selección y cómo funciona en la transformación bacteriana? Son genes contenidos en la secuencia del vector, que permiten la identificación y selección de las células que contienen el fragmento de DNA de interés y funcionan en la transformación bacteriana como marcadores metabólicos, ejemplo de esto sería la inserción del gen Lac Z a un plásmido, el cual  codifica para la síntesis de la enzima beta galactosidasa, haciendo que las bacterias clonadas que contienen es su interior el plásmido con ese gen se tiñan de azul cuando se coloca X-gal, mientras que las bacterias que no la contengan serán blancas.

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